基于荧光标记仿生免疫分析检测有机磷农药残留研究

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为了防止有机磷农药的残留问题对人体健康产生威胁,建立简单、快速、准确的检测有机磷农药残留的方法十分重要。免疫分析方法专一性强、不需要昂贵的仪器、成本效益高,因此被广泛应用于有机磷农药残留的检测。但传统的免疫分析方法抗体制备困难,测定结果的稳定性和准确性相对较低。本课题建立了三种可用于有机磷农药残留检测的仿生免疫分析新方法。主要研究结果如下:1.基于量子点标记的仿生免疫分析-毛细管电泳检测蔬菜中敌百虫残留的方法研究。合成了一种能选择性识别敌百虫农药的分子印迹聚合物。以该分子印迹聚合物作为仿生抗体,建立了具有较高灵敏度的检测敌百虫残留的新型仿生免疫分析方法。在最佳条件下,该方法的最低检出限(LOD,IC15)和灵敏度(IC50)分别为0.35±0.021μg L-1和0.81±0.025 mg L-1。为评价该方法的准确性,对胡萝卜和西葫芦样品进行添加回收实验,添加回收率在80.1%95.3%之间。使用该方法定量检测了油菜和韭菜样品中的敌百虫残留量,检测结果与气相色谱法得到的结果无显著性差异。2.基于量子点标记的仿生荧光免疫分析同时测定水果中三种有机磷农药残留的方法研究。以2-(二乙氧基磷酸)乙酸为模板分子,Fe3O4@SiO2为载体,制备了具有多个识别位点和较高吸附能力的超顺磁性核壳类分子印迹聚合物。以该聚合物作为仿生抗体,量子点作为标记物,建立了一种可同时测定甲基对硫磷、毒死蜱和敌百虫3种有机磷农药的仿生荧光免疫分析方法。在最优条件下,该方法对甲基对硫磷、毒死蜱和敌百虫的最低检出限分别为0.21±0.021μg L-1、0.44±0.069μg L-1、0.32±0.033μg L-1。为了评价该方法的准确性,对添加了甲基对硫磷、毒死蜱和敌百虫标准溶液的苹果和橘子样品进行检测,添加回收率在73.1%119.3%之间。最后将该方法应用于梨、猕猴桃和香蕉样品中3种有机磷农药的检测,检测结果与气相色谱法相比无显著性差异。3.基于磁性辅助荧光探针测定农产品中有机磷农药多残留的方法研究。以6-羧基荧光素(6-FAM)标记的核酸适配体作为探针,功能化的磁性纳米颗粒作为分离载体,成功构建了一种快速、灵敏的检测多种有机磷农药残留的荧光分析方法。对影响竞争结合反应的条件进行优化,在最佳条件下,敌百虫、草甘膦、马拉硫磷的最低检出限分别为72.20 ng L-1、88.80 ng L-1、195.37 ng L-1。将此方法应用于生菜和胡萝卜样品中添加的敌百虫、草甘膦、马拉硫磷农药的测定,添加回收率在79.4%118.6%之间,相对标准偏差(RSDs)小于4.9%。该方法灵敏度高、检出限低、为有机磷农药残留的检测提供了一种新的方法。
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