敲低PES1基因抑制舌癌细胞生长的实验研究

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目的:在Tca8113、SCC6、SCC15三种舌癌细胞中构建稳定表达PES1 sh RNA的稳定细胞系,研究敲低PES1基因对舌癌细胞生长的影响,并进一步研究PES1基因对舌癌细胞周期的调控以及对舌癌细胞的侵袭和迁移能力的影响。方法:利用病毒包装质粒转染293T细胞以获得敲低PES1基因的病毒,将该病毒感染舌癌细胞并筛选能够稳定表达敲低PES1基因的舌癌细胞的稳定克隆,利用Western Blot印记法检测PES1蛋白的表达水平;细胞生长曲线检测PES1基因对舌癌细胞生长的影响;细胞周期实验检测PES1基因对舌癌细胞周期的影响;细胞划痕实验检测PES1基因对舌癌细胞迁移能力的影响;transwell实验检测PES1基因对舌癌细胞侵袭能力的影响。结果:(1)本实验成功获得稳定表达PES1 sh RNA基因的舌癌细胞系;(2)敲低PES1基因后的舌癌细胞生长速度低于对照组(P<0.05);(3)敲低PES1基因,能够使舌癌细胞的生长周期阻滞在G1期,并抑制cyclin D1在舌癌细胞中的表达水平;(4)敲低PES1基因的舌癌细胞的迁移速度低于对照组;(5)敲低PES1基因的舌癌细胞的侵袭速度低于对照组。结论:在舌癌细胞系中敲低PES1基因,能够抑制舌癌细胞的生长,使舌癌细胞周期阻滞在G1期,并且抑制cyclin D1的表达;敲低PES1基因能够抑制舌癌细胞的迁移及侵袭能力,PES1可能成为舌癌基因治疗的靶标。
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