结球甘蓝萌发阶段RNA聚合酶Ⅲ转录的BoNR8长非编码RNA研究

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非编码RNA大多由RNA聚合酶Ⅰ转录,它们没有开放阅读框及编码蛋白质的能力,以RNA分子形式广泛存在于生物体中,其中占人类全部转录产物的近98%,占拟南芥(Arabidopsis thaliana)全部转录产物的近71%,酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中占近29%。这些非编码RNA通过与特定蛋白质结合或影响其他RNA活性来调控基因的表达,在染色质改变、转录调控过程中起重要作用。种子萌发是植物生长发育过程中重要的过渡阶段,它决定了植物萌发后应对外界环境的抵抗能力。目前在植物中发现了一些miRNAs参与种子萌发,如miRNA160(负调控ARF10(Auxin Response Factors 10)基因的表达,影响拟南芥种子萌发);miRNA163(作用于PXMT1 mRNA促进拟南芥种子萌发和幼苗发育阶段根的生长);miRNA402(盐胁迫条件下,促进拟南芥种子萌发和幼苗生长)等。遗憾的是,萌发相关的长非编码RNA还未见报道。结球甘蓝是十字花科(Brassicaceae)芸薹属(Brassica)植物,具有丰富的营养价值和经济价值。虽然对结球甘蓝全基因组进行了测序并制作了全基因组框架图,发现了一些miRNAs,但长非编码RNA还没有被注释。AtR8 RNA是我们前期研究发现的拟南芥RNA聚合酶Ⅲ转录的低氧应激应答型长非编码RNA。本研究中,我们运用生物信息学与生化实验相结合的方法发现了结球甘蓝RNA聚合酶ⅢI转录的AtR8 RNA同源物,即BoNR8 RNA,其在结球甘蓝种子萌发阶段根伸长区表皮层大量表达;非生物、生物、激素等应激处理均影响了 BoNR8 RNA的表达,表明它是一个多应激应答型的长非编码RNA。高浓度NaCl应激条件下,BoNR8 RNA的过量表达影响拟南芥种子萌发;NAA应激条件下,BoNR8 RNA的过量表达促进植物根的伸长和侧根的生长。通过序列比对,我们也发现白菜中BoNR8 RNA同源物,它具有稳定的RNA二级结构并在种子萌发阶段大量表达,NaCl、SA、NAA、P元素缺失、CuC12应激处理均影响了白菜中BoNR8 RNA同源物的表达,表明它也是一个多应激应答型长非编码RNA。
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