【摘 要】
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众所周知,人阿片μ受体(hMOR)在许多组织中介导吗啡的一系列生理、药理效应.近来又发现,外源性阿片物质吗啡可促进人免疫缺陷病毒(HIV)的复制并加速细胞死亡.这一研究结果提
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众所周知,人阿片μ受体(hMOR)在许多组织中介导吗啡的一系列生理、药理效应.近来又发现,外源性阿片物质吗啡可促进人免疫缺陷病毒(HIV)的复制并加速细胞死亡.这一研究结果提示,吸毒成瘾不仅可增加HIV感染的机率,并且可加速AIDS的病程.因吗啡显著的镇痛和成瘾效应,对吗啡生物效应的研究多针对神经系统进行,而对免疫系统的相关研究较少见.在该课题的研究中,拟围绕免疫细胞中hMOR基因转录调控的分子机制进行初步探讨.方法:以T/B淋巴细胞杂交株-CEM x174细胞为研究对象,用RT-RCR的方法检测吗啡对hMOR基因表达的影响.用PCR的方法对hMOR基因5旁侧调控区域进行扩增,用生物信息学的方法分析其中潜在的调控元件,并用引物延伸(primer extension)的方法探寻该序列中的转录起始位点(TIS).用5基因缺失的方法构建一系列萤火虫荧光素酶报道基因重组载体,其中插入不同长度的hMOR基因启动子片段,其3端均位于-2位置,5端分别定位于-2279,-1371,-984,-652,-372及-253(pLUC1~6).将这些重组载体分别瞬时转染导入CEM x174细胞,分析不同片段的启动活性.结论:吗啡对CEM x174细胞的作用可能由hMOR介导.hMOR 5旁侧调控区包含重要的调控元件,克隆的序列中-372~-253及-2279~-1371区包含hMOR基因转录的增强元件,而在-1371~-968及-650~-370区包含抑制元件.这些转录调控元件可能参与了吗啡上调CEM x174细胞内hMOR表达的作用.
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