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甘油二酯(DAG)是一种功能性油脂,可以降低人体餐后血脂水平,具有预防肥胖等功能,能够改善我国居民高脂肪摄入的膳食结构所引起的超重、肥胖、高血脂以及糖尿病等慢性病的流行现状。采用酶法制备DAG具有反应条件温和、选择性强、高效等优点,但游离酶稳定性差、不能再利用且难与产物分离,因此很难实现工业化生产。介孔材料SBA-15具有高度有序的孔道结构、较大的孔径以及表面富含活性羟基等一系列优点,在脂肪酶固定化的应用方面受到越来越广泛的关注。本论文研究了南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)负载于介孔材料SBA-15及其催化甘油解反应合成DAG,论文的主要研究内容和结果如下:(1)优化了SBA-15负载CALB的物理吸附条件,结果为:pH7.0、固定化时间30min和酶浓度70.2μg/ml。采用X-射线衍射、N2物理吸附-脱附、傅里叶转换红外光谱对SBA-15固定CALB的固定化酶样品进行表征。结果表明CALB成功负载到SBA-15上,且没有对SBA-15的孔道结构造成破坏。同时,比较了三种不同孔径大小的SBA-15对酶的固定化率以及固定化酶活力的影响。研究发现,孔径较大的SBA-15的固定化率不到60%,但是其固定化酶的活力却最高。与游离酶相比,固定化酶的热稳定性有显著的提高,在60℃环境下,固定化酶加热4小时后的酶活仍保留最初酶活力的31.4%,而游离酶的酶活力仅保留初始酶活的9.0%。固定化酶在重复利用5次以后,仍可保持最初酶活力的76.4%。(2)研究了CALB负载于SBA-15并将其用于催化甘油解反应。经过单因素分析,最佳反应条件为温度50℃、玉米油4.4g、甘油0.23g、加酶量5wt%(占底物),目标产物DAG在反应12h后达到平衡,继续延长反应时间利于MAG的生产。与商品酶Novozym 435相比,在叔戊醇体系中SBA-15负载CALB的固定化酶(SBA-CALB)的催化效果较好,产物中DAG的含量接近60 wt%。SBA-CALB经过五次反应后,TAG转换率仍保持首次反应的95.8%的转换率,表现出了较好的重复利用性。(3)采用后嫁接法把不同碳链长度咪唑环的烷基功能化离子液体嫁接到介孔材料SBA-15,然后负载脂肪酶CALB,并将其应用于催化甘油解反应。结果表明,离子液体修饰后的SBA-15固定化酶的活力有较大的提高,其中CH3-IL-SBA-CALB的活力是SBA-CALB的2.7倍;但是修饰后载体的固定化酶的热稳定性有一定程度的降低。在反应温度50℃,反应时间12h,玉米油4.4g、甘油0.23g,酶用量为底物质量的5%,叔戊醇16.3ml的条件下,以CH3-IL-SBA-CALB为催化剂的反应TAG的转化率达到71.5%,DAG含量达67.1wt%比SBA-CALB催化的产量高出23.5 wt%。