论文部分内容阅读
目的：构建人食管癌细胞株TE-1辐射抗性模型，观察RPA70基因在辐射抗性模型中的表达，探讨RPA70表达与食管癌辐射抗性之间的关系，为以RPA70为靶点的分子靶向放疗增敏提供体外研究的理论及实验依据。 方法：①大剂量lOGy照射食管癌细胞株TE-1连续传代，建立食管癌细胞辐射抗性模型TE-1R，倒置显微镜下观察细胞形态学变化②设对照组TE-1(未照射)、实验组TE-1R(照射后)分别给予6 MVX射线单次照射0、1、2、4、6、8 Gy，多靶单击模型拟合细胞存活曲线，成克隆实验验证两组细胞的放射敏感性差异。③采用Western blot法检测对照射与实验组两组细胞株中RPA70蛋白表达情况。 结果：①成功构建了TE-1R辐射抗性模型细胞株，细胞集落形成数随照射剂量升高而降低，其差异具有显著性(P<0.01)。成克隆实验显示：对照组细胞D0=2.05、SF2=0.63，实验组细胞D0=2.80，SF2=0.78，两组SF2比较差别有统计学意义(t=-9.83，P<0.05)②Western blot结果显示：对照组RPA70蛋白表达较弱(0.27±0.04)，实验组RPA70蛋白表达较对照组升高(1.22±0.06)，与对照组相比RPA70蛋白表达增加4.5倍，统计学有显著性差异(P<0.01)。 结论：1.成功构建食管癌辐射抗性模型，新构建的细胞系TE-1R比其亲本细胞TE-1更具辐射抗拒性；2.电离辐射能够诱导食管癌细胞RPA70蛋白表达增高，可能与照射后引起的DNA损伤修复有关，其表达增高可能是照射后肿瘤细胞产生辐射抗拒性的重要机制之一。