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目的：通过建立急性缺血性脑卒中大鼠模型，分别给予不同剂量的蛭龙活血通瘀胶囊，观察蛭龙活血通瘀胶囊对缺血性脑卒中大鼠的疗效，并探索其对能量代谢和脑皮层神经元线粒体结构及功能的影响。为蛭龙活血通瘀胶囊临床应用及下一步实验研究提供参考和思路。
方法：1．造模和分组：选择清洁级雄性SD大鼠120只，除假手术组外，其余全部采用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）模型。术后24 h进行评估，造模成功者随机纳入模型组、蛭龙0.25 g/kg组、蛭龙0.5 g/kg组、蛭龙1 g/kg组、胞磷胆碱钠片组，假手术组仅分离血管，不插线栓，每组20只。各给药组药物均采用5%的糖盐水配制，假手术组和模型组给予同体积5%糖盐水，连续灌胃14 d。2．各项指标观察：①一般状态；②神经功能评分；③TTC染色观察缺血侧梗死体积；④HE染色观察脑组织病理形态；⑤酶化学法检测血清能量代谢相关参数（葡萄糖、乳酸、丙酮酸）；⑥酶化学法检测脑皮层能量代谢相关参数（葡萄糖、乳酸、丙酮酸）；⑦酶化学法检测脑皮层线粒体 ATP含量以及 ATP酶活力（Na+-k+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP）；⑧透射电镜观察缺血侧脑皮层神经元线粒体超微结构；⑨流式细胞仪检测脑皮层神经元线粒体膜电位（ JC-1法）。
结果：1．一般状态：假手术组大鼠体型偏胖，毛色润泽，精神、活动良好，饮食和二便均未见异常。模型组大鼠瘦弱萎靡，毛发黄燥，反应迟钝，活动量少，饮食少或不食，部分大鼠出现血尿，大便稀溏。与模型组比较，蛭龙0.5、1 g/kg剂量组在给药第3～4天后精神、活动、饮食等有不同程度的恢复。体重情况：称取所有大鼠术后第14天体重，并进行比较，与模型组相比，各组大鼠体重均有明显升高（P＜0.01）。2．神经功能评分：假手术组所有大鼠在整个实验期间均未见神经功能缺损症状，模型组大鼠神经功能缺损症状则非常明显，评分较高。与模型组比较，各药物组术后第7天和第14天的神经功能评分有不同程度降低，其中，蛭龙0.5、1 g/kg剂量组在两个时间点均明显降低（P＜0.05或P＜0.01）。3．脑组织梗死体积：与假手术组比较，模型组梗死体积比明显增高（P＜0.01），表明造模成功。与模型组比较，蛭龙0.5、1 g/kg剂量组梗死体积比均有减少（P＜0.01），蛭龙0.25 g/kg剂量组有降低趋势（P＜0.05）。4．脑皮层组织病理形态：假手术组皮质结构完整，神经元数量较多，且排列整齐。模型组皮质结构疏松，神经元数量极少，细胞发生明显病变。与模型组比较，蛭龙各剂量组病理改变有不同程度减轻。5.蛭龙对MACO大鼠血清能量代谢相关参数的影响：①血清葡萄糖含量：与假手术组比较，模型组大鼠血清葡萄糖含量明显降低（P＜0.01）。与模型组比较，各药物组血清葡萄糖含量均有升高（P＜0.01），其中，蛭龙各组间呈剂量依赖。②血清乳酸含量：与假手术组比较，模型组大鼠血清乳酸含量明显升高。与模型组比较，各药物组血清乳酸含量均有不同程度降低，其中，蛭龙0.5、1 g/kg剂量组具有显著统计学意义（P＜0.01）。③血清丙酮酸含量：与假手术组比较，模型组大鼠血清丙酮酸含量有所降低（P＜0.01）。与模型组比较，各药物组血清丙酮酸含量均有不同程度恢复，其中，蛭龙0.25 g/kg差异有统计学意义（P＜0.05），蛭龙0.5、1 g/kg剂量组差异有显著统计学意义（P＜0.01）。④血清乳酸/丙酮酸比值：与假手术组比较，模型组大鼠血清乳酸/丙酮酸比值明显升高（P＜0.01）。与模型组比较，各药物组血清乳酸/丙酮酸比值均有不同程度下降，差异具有显著性（P＜0.01）。6．脑皮层能量代谢相关参数：①脑皮层葡萄糖含量：与假手术组比较，模型组大鼠脑皮层葡萄糖含量明显降低（P＜0.01）。与模型组比较，蛭龙各剂量组脑皮层葡萄糖含量有不同程度升高（P＜0.05或P＜0.01）。②脑皮层乳酸含量：与假手术组比较，模型组大鼠脑皮层乳酸含量显著升高（P＜0.01）。蛭龙各剂量组与模型组相比脑皮层乳酸含量均有降低（P＜0.05或P＜0.01）。③脑皮层丙酮酸含量：与假手术组比较，模型组大鼠脑皮层丙酮酸含量明显降低（P＜0.01）。与模型组比较，蛭龙0.5 g/kg剂量组脑皮层丙酮酸含量有所升高（P＜0.05），蛭龙1 g/kg剂量含量显著升高（P＜0.01）。④脑皮层乳酸/丙酮酸比值：与假手术组比较，模型组大鼠脑皮层乳酸/丙酮酸比值明显升高（P＜0.01）。与模型组比较，蛭龙0.5、1 g/kg剂量组脑皮层乳酸/丙酮酸比值呈不同程度下降，差异均具有显著统计学意义（P＜0.01）。7．脑皮层神经元线粒体ATP含量及ATP酶活性：①脑皮层神经元线粒体ATP含量：与假手术组比较，模型组神经元线粒体ATP含量显著下降（P＜0.01）。与模型组比较，蛭龙0.25 g/kg剂量组神经元线粒体ATP含量升高无统计学意义（P＞0.05）；蛭龙0.5、1 g/kg剂量组均有明显升高（P＜0.01）。②脑皮层神经元线粒体Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性：与假手术组比较，模型组神经元线粒体 Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均显著下降（P＜0.01）。与模型组比较，蛭龙0.5、1 g/kg剂量组线粒体Na+-K+-ATP酶活性、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均明显升高（P＜0.01），而蛭龙0.25 g/kg剂量组升高无统计学意义（P＞0.05）。8．脑皮层神经元线粒体超微结构：假手术组脑皮层神经元线粒体形态呈长椭型，膜和嵴结构正常。模型组线粒体形态以圆形为主，嵴溶解断裂，甚至消失，呈空泡样改变。经药物处理后，线粒体损伤有不同程度的减轻。与模型组比较，蛭龙0.5、1 g/kg剂量组线粒体数量增多，膜结构变清晰，嵴结构损伤减少，且剂量越大，损伤越小。9．脑皮层神经元线粒体膜电位：与假手术组比较，模型组绝大多数线粒体膜电位均有下降，其中，膜电位正常的线粒体占比明显减少，而膜电位下降的线粒体占比则明显升高，具有显著统计学差异（P＜0.01）。与模型组比较，蛭龙各剂量组膜电位正常的线粒体比值均有提升，而膜电位下降的线粒体占比有不同程度的减少，差异均具有显著统计学意义（P＜0.01）。
结论：1．蛭龙活血通瘀胶囊可有效减轻缺血性脑卒中模型大鼠神经功能缺损症状和脑组织病理损伤。2．蛭龙活血通瘀胶囊能调节缺血性脑卒中模型大鼠血液和脑细胞的能量代谢。3．蛭龙活血通瘀胶囊可以减轻缺血性脑卒中模型大鼠皮层神经元线粒体一般结构和功能损伤，具有良好的神经保护作用。
方法：1．造模和分组：选择清洁级雄性SD大鼠120只，除假手术组外，其余全部采用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）模型。术后24 h进行评估，造模成功者随机纳入模型组、蛭龙0.25 g/kg组、蛭龙0.5 g/kg组、蛭龙1 g/kg组、胞磷胆碱钠片组，假手术组仅分离血管，不插线栓，每组20只。各给药组药物均采用5%的糖盐水配制，假手术组和模型组给予同体积5%糖盐水，连续灌胃14 d。2．各项指标观察：①一般状态；②神经功能评分；③TTC染色观察缺血侧梗死体积；④HE染色观察脑组织病理形态；⑤酶化学法检测血清能量代谢相关参数（葡萄糖、乳酸、丙酮酸）；⑥酶化学法检测脑皮层能量代谢相关参数（葡萄糖、乳酸、丙酮酸）；⑦酶化学法检测脑皮层线粒体 ATP含量以及 ATP酶活力（Na+-k+-ATP、Ca2+-Mg2+-ATP）；⑧透射电镜观察缺血侧脑皮层神经元线粒体超微结构；⑨流式细胞仪检测脑皮层神经元线粒体膜电位（ JC-1法）。
结果：1．一般状态：假手术组大鼠体型偏胖，毛色润泽，精神、活动良好，饮食和二便均未见异常。模型组大鼠瘦弱萎靡，毛发黄燥，反应迟钝，活动量少，饮食少或不食，部分大鼠出现血尿，大便稀溏。与模型组比较，蛭龙0.5、1 g/kg剂量组在给药第3～4天后精神、活动、饮食等有不同程度的恢复。体重情况：称取所有大鼠术后第14天体重，并进行比较，与模型组相比，各组大鼠体重均有明显升高（P＜0.01）。2．神经功能评分：假手术组所有大鼠在整个实验期间均未见神经功能缺损症状，模型组大鼠神经功能缺损症状则非常明显，评分较高。与模型组比较，各药物组术后第7天和第14天的神经功能评分有不同程度降低，其中，蛭龙0.5、1 g/kg剂量组在两个时间点均明显降低（P＜0.05或P＜0.01）。3．脑组织梗死体积：与假手术组比较，模型组梗死体积比明显增高（P＜0.01），表明造模成功。与模型组比较，蛭龙0.5、1 g/kg剂量组梗死体积比均有减少（P＜0.01），蛭龙0.25 g/kg剂量组有降低趋势（P＜0.05）。4．脑皮层组织病理形态：假手术组皮质结构完整，神经元数量较多，且排列整齐。模型组皮质结构疏松，神经元数量极少，细胞发生明显病变。与模型组比较，蛭龙各剂量组病理改变有不同程度减轻。5.蛭龙对MACO大鼠血清能量代谢相关参数的影响：①血清葡萄糖含量：与假手术组比较，模型组大鼠血清葡萄糖含量明显降低（P＜0.01）。与模型组比较，各药物组血清葡萄糖含量均有升高（P＜0.01），其中，蛭龙各组间呈剂量依赖。②血清乳酸含量：与假手术组比较，模型组大鼠血清乳酸含量明显升高。与模型组比较，各药物组血清乳酸含量均有不同程度降低，其中，蛭龙0.5、1 g/kg剂量组具有显著统计学意义（P＜0.01）。③血清丙酮酸含量：与假手术组比较，模型组大鼠血清丙酮酸含量有所降低（P＜0.01）。与模型组比较，各药物组血清丙酮酸含量均有不同程度恢复，其中，蛭龙0.25 g/kg差异有统计学意义（P＜0.05），蛭龙0.5、1 g/kg剂量组差异有显著统计学意义（P＜0.01）。④血清乳酸/丙酮酸比值：与假手术组比较，模型组大鼠血清乳酸/丙酮酸比值明显升高（P＜0.01）。与模型组比较，各药物组血清乳酸/丙酮酸比值均有不同程度下降，差异具有显著性（P＜0.01）。6．脑皮层能量代谢相关参数：①脑皮层葡萄糖含量：与假手术组比较，模型组大鼠脑皮层葡萄糖含量明显降低（P＜0.01）。与模型组比较，蛭龙各剂量组脑皮层葡萄糖含量有不同程度升高（P＜0.05或P＜0.01）。②脑皮层乳酸含量：与假手术组比较，模型组大鼠脑皮层乳酸含量显著升高（P＜0.01）。蛭龙各剂量组与模型组相比脑皮层乳酸含量均有降低（P＜0.05或P＜0.01）。③脑皮层丙酮酸含量：与假手术组比较，模型组大鼠脑皮层丙酮酸含量明显降低（P＜0.01）。与模型组比较，蛭龙0.5 g/kg剂量组脑皮层丙酮酸含量有所升高（P＜0.05），蛭龙1 g/kg剂量含量显著升高（P＜0.01）。④脑皮层乳酸/丙酮酸比值：与假手术组比较，模型组大鼠脑皮层乳酸/丙酮酸比值明显升高（P＜0.01）。与模型组比较，蛭龙0.5、1 g/kg剂量组脑皮层乳酸/丙酮酸比值呈不同程度下降，差异均具有显著统计学意义（P＜0.01）。7．脑皮层神经元线粒体ATP含量及ATP酶活性：①脑皮层神经元线粒体ATP含量：与假手术组比较，模型组神经元线粒体ATP含量显著下降（P＜0.01）。与模型组比较，蛭龙0.25 g/kg剂量组神经元线粒体ATP含量升高无统计学意义（P＞0.05）；蛭龙0.5、1 g/kg剂量组均有明显升高（P＜0.01）。②脑皮层神经元线粒体Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性：与假手术组比较，模型组神经元线粒体 Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均显著下降（P＜0.01）。与模型组比较，蛭龙0.5、1 g/kg剂量组线粒体Na+-K+-ATP酶活性、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均明显升高（P＜0.01），而蛭龙0.25 g/kg剂量组升高无统计学意义（P＞0.05）。8．脑皮层神经元线粒体超微结构：假手术组脑皮层神经元线粒体形态呈长椭型，膜和嵴结构正常。模型组线粒体形态以圆形为主，嵴溶解断裂，甚至消失，呈空泡样改变。经药物处理后，线粒体损伤有不同程度的减轻。与模型组比较，蛭龙0.5、1 g/kg剂量组线粒体数量增多，膜结构变清晰，嵴结构损伤减少，且剂量越大，损伤越小。9．脑皮层神经元线粒体膜电位：与假手术组比较，模型组绝大多数线粒体膜电位均有下降，其中，膜电位正常的线粒体占比明显减少，而膜电位下降的线粒体占比则明显升高，具有显著统计学差异（P＜0.01）。与模型组比较，蛭龙各剂量组膜电位正常的线粒体比值均有提升，而膜电位下降的线粒体占比有不同程度的减少，差异均具有显著统计学意义（P＜0.01）。
结论：1．蛭龙活血通瘀胶囊可有效减轻缺血性脑卒中模型大鼠神经功能缺损症状和脑组织病理损伤。2．蛭龙活血通瘀胶囊能调节缺血性脑卒中模型大鼠血液和脑细胞的能量代谢。3．蛭龙活血通瘀胶囊可以减轻缺血性脑卒中模型大鼠皮层神经元线粒体一般结构和功能损伤，具有良好的神经保护作用。