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sga基因是大多数Methylobacterium sp．中丝氨酸循环途径里的一个关键酶基因，与单碳化合物的同化及二碳化合物的代谢有着密切的关系。根据已报道的Methylobacterium extorquens AM1的sga基因序列，合成寡核苷酸引物，用本实验室保存的甲醇利用菌M．sp．MB200的染色体DNA为模板，通过PCR方法扩增出sga基因，测序分析表明该片段与AM1的sga基因在核苷酸水平有95％的同源性，氨基酸水平具有85％的同源性。但在核苷酸序列的第48 bp处比AM1的sga序列多出54个bp的碱基，氨基酸的序列数也在该位置有相应的增加。 利用自杀质粒pK18mob构建含有部分sga基因片段的重组质粒，选择正向连接的重组质粒，通过三亲本结合后导入野生菌株MB200中，经过进一步同源单交换，MB200体内sga基因被pK18mob插入突变，利用PCR方法和Southern杂交对突变菌株MB200sTB进行验证。利用载体pLAFRJ构建含有完整sga基因的重组质粒，通过三亲本结合方法分别导入突变株MB200sTB和野生菌株MB200中，分别得到MB200sHB和MB200sga。利用酶切和PCR方法对MB200sHB和MB200sga进行验证。 分析结果表明MB200sTB的丝氨酸乙醛酸氨基转移酶(SGAT)的酶活性消失，同时失去了在以甲醇为唯一碳源的培养基上生长的能力，