【摘 要】
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该文以从新疆棉株上分离得到的一株能够产生新型抗真菌多肽捷安肽素(Jiean-Peptide)的坚强牙孢杆菌(Bacillus firmus,代号ZK)为主要研究对象,针对该细菌发酵过程中存在的关键
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该文以从新疆棉株上分离得到的一株能够产生新型抗真菌多肽捷安肽素(Jiean-Peptide)的坚强牙孢杆菌(Bacillus firmus,代号ZK)为主要研究对象,针对该细菌发酵过程中存在的关键性问题,经摇瓶发酵、5L罐发酵及1000L罐发酵技术逐级放大,系统进行了捷安肽素菌株发酵工艺的研究.通过单因素实验和正交优化实验,确定了ZK菌株摇瓶发酵产捷安肽素的最佳培养基和培养条件.对菌株ZK进行多批次5L发酵罐分批发酵和补料分批发酵过程参数优化的研究,掌握了该菌的生长、产素最佳条件和代谢规律,并初步建立捷安肽素菌株的5L发酵罐发酵工艺.优化分批发酵工艺参数为:摇瓶试验获得的培养基,菌种种龄为20h,接种量为10﹪.转速为300rmin<-1>,通气条件为1:1.0vvm,pH<,0>8.0,培养温度为30℃,周期为36h.因分批发酵时较高的底物浓度会抑制菌体的生长及其合成捷安肽素的能力,且单纯地改变分批发酵方式,不能十分有效地提高产率.为了进一步提高菌体产捷安肽素的能力,该文采用补料分批发酵的方法,研究了提高捷安肽素菌株产素能力的可能性.选择2﹪左右的初始还原糖及生物氮素水解液浓度,在发酵进行到12h到9h时,分别采用单次补加和恒速流加方式补加含有葡萄糖及生物氮素的营养液.在5L发酵罐发酵工艺的基础上,进行了1000L罐的发酵放大培养,通过研究菌株ZK在1000L罐进行发酵培养时的代谢规律,建立了捷安肽素菌株1T罐发酵工艺为:搅拌转速180rmin<-1>,通气比1:0.62~1:0.65vvm,发酵液最适初始pH为8.0,发酵最适温度为30℃,接种量为0.4﹪,发酵周期为40h.发酵罐生产重复性试验结果都表明,ZK菌株在中试条件下可以稳定地发酵生产捷安肽素,从而为捷安肽素的工业化发酵生产提供一定的实验和理论基础.
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