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第一部分PKCδ相关信号通路因子在体外原代培养垂体GH腺瘤胞内的表达目的探究原代培养人垂体GH腺瘤细胞的方法,证实PKCδ及其相关信号通路因子表达于人垂体GH腺瘤细胞胞内。方法收集5例垂体生长激素腺瘤患者术中切除肿瘤组织,同时行原代细胞培养及常规石蜡包埋切片,免疫荧光及免疫组化法检测PKCδ、CREB、ERK1/2蛋白的表达情况。结果静置24小时后,可见观察到原代细胞呈圆形透亮状贴壁生长,可呈“铺路石”样外观。免疫组化及免疫荧光法证实PKCδ及ERK1/2主要表达于胞质。CREB主要表达于胞核,不同样本之间表达水平存在个体差异。结论成功获得体外原代培养人垂体GH腺瘤细胞,PKCδ、CREB、ERK1/2均表达于人垂体GH腺瘤细胞内,且表达水平存在个体差异。第二部分PKCδ相关信号通路因子在垂体GH腺瘤原代培养细胞模型中作用及调节机制研究目的探究PKCδ相关信号通路因子在垂体GH腺瘤原代培养细胞模型中的作用及调节机制。方法使用PMA、Rottlerin及两者联合分别干预原代培养的人垂体GH腺瘤细胞,GH-Elisa检测各实验分组细胞分泌GH水平变化,CCK-8检测各实验分组细胞活性变化,Western blot检测CREδ、ERK1/2蛋白磷酸化水平变化结果加入PMA后,细胞GH分泌及活化增殖水平上调,p-CREB以及p-ERK1/2的磷酸化水平均呈不同程度上调趋势；而加入Rottlerin后,细胞GH分泌及活化增殖水平下降,p-PKCδ、p-CREB以及p-ERK1/2的磷酸化水平均呈不同程度下降趋势,上述两组与对照组相比p值均<0.05,存在统计学差异。联合使用PMA及Rottlerin后,较之单纯使用PMA,细胞GH分泌及活化增殖水平下降,p-CREB以及p-ERK1/2均呈不同程度下降趋势：但较之单纯使用Rottlerin细胞GH分泌及活化增殖水平上调,p-CREB以及p-ERK1/2均呈不同程度上调趋势,上述p值均<0.05,存在统计学差异。结论在原代培养的人垂体GH腺瘤中,激活PKCδ不仅可轻微提高CREB的磷酸化水平并部分促进GH分泌的效应,同时可提升ERK1/2的磷酸化水平并增强细胞的增殖效应。但鉴于不同原代样本间存在较大个体差异,上述结论尚需扩充例数以便进一步研究证实。第三部分SSTA疗效与PKCδ相关信号通路的相互作用及其与gsp癌基因的关系目的探究SSTA疗效与PKCδ相关信号通路因子的关系,及其与gsp癌基因的联系方法使用SSTA干预原代培养的人垂体GH腺瘤细胞,GH-Elisa检测各实验分组细胞分泌GH水平变化,CCK-8检测各实验分组细胞活性变化,Western blot检测PKCδ、CREB、ERK1/2蛋白磷酸化水平变化。同时筛选20例体内及体外SSTA抑制效果一致的垂体GH腺瘤患者资料,通过PCR法检测gsp突变情况。结果20例样本中,SSTA有效13例,其中gsp癌基因阳性6例,阴性7例；无效7例,均为gsp癌基因阴性。gsp癌基因(+)病例组GH分泌抑制效果优于gsp癌基因(-)病例组,但进一步行χ2检验示p值>0.05,提示gsp阳/阴性样本间SSTA有效率差别无统计学差异。使用SSTA干预原代培养的人垂体GH腺瘤细胞后,细胞GH分泌及活化增殖水平下降,同时p-PKCδ、p-CREB以及p-ERK1/2均呈不同程度下降趋势结论SSTA作用于原代培养的人垂体GH腺瘤细胞后,细胞的GH分泌及增殖活性下降水平存在个体差异,同时p-PKCδ、p-CREB以及p-ERK1/2均呈不同程度下降趋势。使用SSTA药物后,gsp癌基因(+)病例组GH分泌抑制效果优于gsp癌基因(-)病例组,但就本组病例而言,尚不能认为组间差异具有统计学意义。鉴于不同原代样本间存在较大个体差异,上述结论尚需扩充例数以便进一步研究证实。