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【研究目的】骨髓增殖性肿瘤(MPNs)起源于多能造血干细胞,其主要特点是一系或者多系分化相对较成熟的骨髓细胞克隆性异常增生。增生的细胞常表现为多能髓样造血干细胞所属的细胞系（包括红细胞系、巨核细胞系、粒－单核细胞系）中的一系或多系细胞恶性增生，可向终末分化成熟，但细胞形态和功能却相对正常。根据其增生的细胞成分的不同，本类疾病可分为以下4种经典亚型：真性红细胞增多症（PV）、原发性血小板增多症（ET）、慢性粒细胞白血病（CML)和原发性骨髓纤维化(PMF)，这4种疾病的表现虽然各不相同，但在一定条件下相互之间却可以转化。目前多项研究表明BCR-ABL融合基因阴性的骨髓增殖性肿瘤患者中JAK2基因12号或14号外显子中存在一种高频点突变---JAK2V617F，即JAK2基因上第617位密码子(GTC)第一位碱基发生G→T点突变，导致其所编码的缬氨酸(GTC)错义编码为苯丙氨酸(TTC)，导致JAK2蛋白激酶活性增强，最终导致了MPNs的发生。正是由于JAK2V617F基因突变在多种疾病中都有发现，所以检测人群中该基因突变将会对进一步阐明其引发的广谱的血液病提供诊断依据。本课题通过对46例恶性血液肿瘤标本进行JAK2V617F突变的检测，初步了解JAK2V617F在恶性血液病尤其是MPNs中的分布情况，为临床诊断及治疗提供依据。【研究方法】1、提取基因组DNA:对46例恶性血液病患者及10例健康对照者的外周血（骨髓）标本提取单个核细胞基因组DNA；2、进行PCR扩增:设计并合成JAK2V617F突变基因的特异性引物，建立并优化PCR扩增体系及反应条件，进行扩增；3、琼脂糖凝胶电泳鉴定:配制琼脂糖凝胶，电泳进行鉴定，仅出现一条条带结果者为JAK2阴性，出现两条条带结果者为JAK2阳性；4、基因测序:对所有标本直接基因测序进行验证；【研究结果】：1、琼脂糖凝胶电泳检测结果为46例恶性血液病中共12例患者存在JAK2V617F基因突变：7例PV(87.5%),4例ET(33.3%)，1例PMF(1/2)；2、基因测序结果为PV组阳性率为7/8(87.5%),ET组阳性率为4/12(33.3%),PMF组阳性率为1/2；3、AML、ALL、CML、CNL、CEL等其他恶性血液病患者及正常对照提示两种检验方法均为阴性。【结论】：1、BCR-ABL阴性的MPNs患者中存在JAK2V617F点突变，其它恶性血液病患者如AML、ALL、CML、CNL等未检测到JAK2V617F；2、JAK2V617F在PV、ET、PMF血液病患者中的分布有显著的差异性(P<0.05)；3、JAK2V617F可以参与到PV、ET、PMF的临床诊断及鉴别诊断中；4、AS-PCR方法在临床检测中可以开展。