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【目的】研究不同剂量的褪黑素预处理对小鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用及其相关机制。【方法】(1)30只c57BL/6J小鼠随机分为5组,每组6只。分别为:(1)假手术组(sham),(2)肺缺血再灌注组(IR组),(3)肺缺血再灌注加10mg/kg褪黑素预处理组(IR+10MT),(4)肺缺血再灌注加20mg/kg褪黑素预处理组(IR+20MT),(5)肺缺血再灌注加30mg/kg褪黑素预处理组(IR+30MT)。缺血再灌注组及缺血再灌注加褪黑素预处理组((2)、(3)、(4)、(5)groups)采用开胸后经无创显微血管夹夹闭左肺肺门(包括左肺动、静脉及支气管)60min,再灌注120min后处死小鼠并留取左肺标本以待检测。IR+10MT组、IR+20MT组、IR+30MT组分别于缺血前15min及再灌注前10min腹腔注射5mg/kg、10mg/kg,15mg/kg褪黑素。sham组开胸离断左下肺韧带并游离肺门,60min后关闭胸腔,关胸120min后处死小鼠,并取小鼠左肺标本用于检测;(2)光镜下观察肺组织HE染色病理变化,并评估肺损伤程度;(3)计算肺湿干重比;(4)检测肺组织超氧化物歧化酶(SOD)含量变化;(5)检测肺组织丙二醛(MDA)含量变化;(6)TUNEL检测肺组织细胞凋亡;(7)Western Blot方法检测不同小组TNF-α,IL-1β、NF-k B、IKK-γ的蛋白表达量的变化;Western Blot方法检测各小组中凋亡相关蛋白(caspase-3,BAX,bcl-2)表达量的变化;(8)免疫组化实验检测各小组抗氧化指标(GPx、GR)的表达;【结果】(1)光学显微镜下观察肺组织病理变化损伤最严重的是IR组,损伤最轻的是sham组,IR+10MT组、IR+20MT组及IR+30MT组损伤较IR组损伤减轻,其中IR+20MT组减轻最明显,差异具有统计学意义(P<0.05);(2)肺湿干重比IR组较Sham组明显升高,IR+10MT组、IR+20MT组、IR+30MT组较IR组明显降低,其中IR+20MT组降低最明显,差异有统计学意义(P<0.05);(3)MDA含量IR组较Sham组明显升高,IR+10MT组、IR+20MT组、IR+30MT组较IR组明显降低,其中IR+20MT组降低最明显,差异具有统计学意义(P<0.05);(4)SOD含量IR组较Sham组明显降低,IR+10MT组、IR+20MT组、IR+30MT组SOD含量较IR组明显升高,其中IR+20MT组升高最明显,差异具有统计学意义(P<0.05);(5)TUNEL检测细胞凋亡发现,IR组较sham组凋亡增多,IR+10MT、IR+20MT、IR+30MT组较IR组凋亡减少,其中IR+20MT组较IR+10MT及IR+30MT组凋亡减少,差异有统计学意义(P<0.05)(6)Western blot检测各组炎症因子TNF-α,IL-1β,NF-κb、IKK-γ的表达变化。实验结果显示:相较于IR组,IR+10MT组、IR+20MT组、IR+30MT组显著降低TNF-α,NF-κB,IL-1β,IKK-γ的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05);(7)Western blot检测各组caspase-3,BAX的蛋白表达水平,IR+10MT组、IR+20MT组、IR+30MT组较IR组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);bcl-2蛋白表达水平在IR+10MT组、IR+20MT组、IR+30MT组较IR组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);(8)细胞免疫组化实验显示,GPX、GR两个指标在Sham组、IR组,IR+10MT组、IR+30MT组、IR+20MT组逐渐升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。【结论】1、褪黑素预处理可显著减轻肺肺缺血再灌注损伤,20mg/kg褪黑素预处理相对10mg/kg、30mg/kg褪黑素预处理对减轻C57BL/6J小鼠肺缺血再灌注损伤效果更好。2、褪黑素预处理减轻小鼠肺缺血再灌注损伤机制可能与减轻缺血再灌注期间氧化反应、抑制TNF-α/NF-κΒ/凋亡通路相关。