不同干预方式对大鼠非酒精性脂肪肝的干预效果及其作用机制的研究

来源 :宁夏医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:oishiocean
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目的通过高脂饮食(high fat diet,HFD)诱导SD大鼠建立非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型,分别探讨枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)、有氧运动以及二者联合对大鼠NAFLD的干预效果及其作用机制,为临床治疗NAFLD提供一定的理论依据。方法根据体重将54只SPF级雄性SD大鼠随机分为2组:即对照组(给予普通饲料)和HFD组(给予高脂饲料)。两组分别喂养10周后根据病理切片的结果判断造模是否成功。将造模成功后的大鼠随机分为HFD组(无干预)、枸杞多糖组(LBP 50 mg/kg)、有氧运动组(33 cm/s 60 min/d),联合组(LBP50 mg/kg+33cm/s 60 min/d)每组10只,干预8周。另设对照组,给予正常饮食。干预结束后,禁食12 h,测定大鼠空腹血糖及体重;10%水合氯醛腹腔注射麻醉处死,取血液样本和肝脏组织,计算肝指数,观察大鼠肝脏外观,病理切片观察肝脏脂肪变程度。用相应的试剂盒检测大鼠血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三脂(triacylglycerol,TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、胰岛素及血浆irisin水平;RT-PCR和Western blot法分别检测肝脏中p38MAPK、PGC-1α、FNDC5基因与蛋白的表达量。LBP中多糖含量检测用苯酚硫酸法,LBP的单糖组成用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)。结果(1)LBP是由摩尔比为0.66:1:0.93:12.55:0.31:0.53的半乳糖醛酸,甘露糖,鼠李糖:葡萄糖,半乳糖,阿拉伯糖组成的杂多糖;(2)与HFD组肝脏病理结果比较,3个干预组大鼠肝脏外观在边缘圆钝度、包膜紧张度、质地、油腻程度、色泽等方面均有一定的好转,且体重均降低;病理结果显示脂肪样变程度均减轻;(3)与HFD组比较,3个干预组大鼠血清TC、AST/ALT均降低(P<0.05);有氧运动组和联合干预组大鼠血清TG显著降低(P<0.05),枸杞多糖组HDL水平明显升高(P<0.05),有氧运动组LDL水平降低(P<0.05),肝脏TC和TG均明显降低(P<0.05);(4)与HFD组比较,3个干预组大鼠血清和肝脏SOD水平均明显升高,MDA水平均明显降低(P<0.05);(5)与HFD组比较,大鼠血浆irisin水平显著升高,胰岛素抵抗指数明显降低(P<0.05);(6)与HFD组比较,3个干预组p38MAPK基因表达量明显降低,有氧运动组和联合组p38MAPK蛋白明显降低,PGC-1α和FNDC5基因和蛋白的表达量均显著升高(P<0.05)。结论枸杞多糖和有氧运动可改善大鼠非酒精性脂肪肝的脂代谢紊乱,提高抗氧化能力,降低肝脏脂质沉积程度,减轻体重。可能与通过抑制肝脏p38MAPK的表达,促进肝脏PGC-1α/FNDC5的表达,增加血浆irisin的水平有关。
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