【摘 要】
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目的 近年来由于人口老龄化趋势越来越明显,不育、少育、晚育妇女逐年增多,女性绝经年龄普遍延迟,同时由于外源性雌激素的广泛应用等因素的影响,子宫内膜癌发病率在世界范围
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目的 近年来由于人口老龄化趋势越来越明显,不育、少育、晚育妇女逐年增多,女性绝经年龄普遍延迟,同时由于外源性雌激素的广泛应用等因素的影响,子宫内膜癌发病率在世界范围内呈上升趋势。如何早期诊断,并准确判定肿瘤的恶性程度及病变范围是影响预后的重要因素。本研究采用RT-PCR和免疫组化的方法检测石蜡标本中CD44v6、nm23H1在60例子宫内膜癌标本中的表达情况,推测它们与子宫内膜癌临床病理的联系。 材料与方法 1.临床资料 选择中国医科大学1998～2004年子宫内膜癌术后石蜡标本共60例,诊断全部经病理证实。患者术前均未经放化疗,且不合并其他肿瘤。 2.主要试剂 Trizol总RNA提取液购自上海生工公司。逆转录试剂盒及引物由宝生物工程（大连）有限公司提供。鼠抗人CD44（v6）单克隆抗体和鼠抗人nm23H1抗体均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。 3.实验方法 （1）RT-PCR:石蜡切片8μ,二甲苯脱蜡,无水乙醇脱水,Trizol总RNA提取液提取总RNA,紫外分光光度测定OD260/280,估计mRNA纯度。按两步法反转录mRNA,扩增cDNA。琼脂糖凝胶电泳,EB染色,紫外灯下观察结果并拍照。CD44v6、nm23-H1均以PBS代替逆转录酶作为阴性对照。 （2）免疫组织化学染色:石蜡标本切片,常规脱蜡到水,H2O2灭活内源性过氧化物酶活性。热修复,正常血清封闭。分别滴加CD44v6、nm23-H1
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