REDV多肽和智能基因递送系统共修饰纤维膜表面的制备及表征

来源 :周佳莹 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xj2jx0oo0
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小口径人工血管移植物对血管类疾病的治疗具有至关重要的意义,但因易形成血栓而导致其临床应用受到限制。近年来,血管移植物内表面的快速内皮化是抗血栓形成和提高血管长期通畅率的一种有效方法。目前,快速内皮化的主要瓶颈是移植物内表面不易粘附内皮细胞,且促进内皮细胞增殖和迁移的能力较差。本研究通过静电纺丝技术制备了一种基于聚(丙交酯-共-己内酯)共聚物和明胶的小口径血管移植物,并在其表面联合修饰了内皮细胞选择性粘附多肽ArgGlu-Asp-Val(REDV)和酶响应型基因递送系统,实现了血管移植物的原位快速内皮化。首先,合成了生物素官能化的两亲性阳离子共聚物m PEG-b-PLMD-gPEI-PEG-Biotin,将其负载ZNF580质粒(p ZNF580)形成基因复合物。其次,利用生物素-亲和素的强相互作用,将基因复合物通过具有基质金属蛋白酶响应断裂性质的多肽链GPQGIWGQ-C连接在移植物表面,由此构建了响应型基因递送表面。这种酶促释放的基因递送表面在血液环境中是安全且稳定的。研究结果表明,REDV多肽能够选择性粘附内皮细胞,随后内皮细胞所分泌丰富的基质金属蛋白酶促使GPQGIWGQ-C多肽链断裂,基因复合物被智能地释放出来,进一步转染内皮细胞,促进内皮细胞的增殖和迁移,实现了移植物表面的原位快速内皮化。体外细胞实验证实了低毒性m PEG-b-PLMD-g-PEI-PEG-Biotin/p ZNF580基因复合物能有效转染内皮细胞。基因复合物修饰表面可以被内皮细胞触发,并介导p ZNF580有效递送到内皮细胞核中,从而增强内皮细胞的增殖和迁移,提高了体外血管形成能力。大鼠腹主动脉血管移植实验证明了REDV多肽和响应型基因递送系统共修饰的血管移植物在体内可加速内皮层的形成,这主要得益于REDV多肽和酶促基因转染的协同机制。本论文为血液接触式医疗器械的快速内皮化提供了新策略,对于血管类疾病的治疗具有重要的研究意义。
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