【摘 要】
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目的观察短发夹RNA (shRNA)沉默IGF-Ⅱ基因在人肾上腺皮质瘤细胞株SW-13的表达,并探讨IGF-Ⅱ基因对细胞的增殖与凋亡的影响与沉默IGF-Ⅱ基因后对SW-13细胞PI3K/AKT信号传导通
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目的观察短发夹RNA (shRNA)沉默IGF-Ⅱ基因在人肾上腺皮质瘤细胞株SW-13的表达,并探讨IGF-Ⅱ基因对细胞的增殖与凋亡的影响与沉默IGF-Ⅱ基因后对SW-13细胞PI3K/AKT信号传导通路的影响。方法构建针对人IGF-Ⅱ基因的shRNA慢病毒表达载体,稳定转染人肾上腺皮质瘤细胞株SW-13。实验分3组:空白对照组、阴性对照组、IGF-Ⅱ-shRNA组,应用RT-PCR检测转染后IGF-Ⅱ、PI3K、 AKTmRNA的表达,以MTT比色法、流式细胞术检测转染后SW-13细胞的生长增殖、凋亡的变化。结果shRNA表达载体的构建经测序证实构建成功。IGF-Ⅱ-shRNA组中IGF-Ⅱ、PI3K、AKT mRNA的表达量分别为(0.95±0.006)E-04、(0.13±0.004)E-04、(0.64±0.108)E-04,明显少于阴性对照组和空白对照组(P<0.01)。IGF-Ⅱ-shRNA组较之其他两组能明显抑制细胞的增殖(均P<0.01),IGF-Ⅱ-shRNA组的凋亡率与其他两组相比显著增加(均P<0.01)。结论靶向IGF-Ⅱ基因的shRNA可以有效抑制人肾上腺皮质瘤细胞株SW-13组的生长,并促进细胞的凋亡,并通过降低Akt、PI3K mRNA的表达水平,明显抑制PI3K/Akt信号传导通路。IGF-Ⅱ基因可能是肾上腺皮质腺癌治疗的一个潜在靶点。
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