Stk33在肺癌细胞系及肺癌组织中的表达研究

来源 :昆明医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huacheng5215
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近年来,肿瘤的发病率和死亡率迅速上升,特别是肺癌,虽然治疗技术有了很大的提高,但5年生存率并没有明显改善,且许多患者就诊时已属晚期,失去了最佳治疗时机.肿瘤的早期诊断和治疗是目前亟待解决的问题.目前研究显示,在肿瘤的发生发展过程中存在细胞增殖和凋亡的失衡.STK33(A novel serine/threonine kinase gene,STK33)在许多肿瘤组织中表达,是迄今发现的作用最新的非癌基因,在肺癌发生发展中起重要作用。丝氨酸/苏氨酸激酶33基因(STK33/Stk33)确定是在人类测序染色体11p15.3区域及其小鼠的7号染色体。该STK33/Stk33表达模式和激酶组的一些相关的成员相似,在大多数癌组织中表达。在小鼠(也在人类中),在一些具体的组织、像睾丸细胞、肺上皮细胞、肺泡巨噬细胞、横向的视网膜细胞中存在表达差异。此外,在小鼠胚胎期心脏,大脑和脊髓中的高表达具有重要意义。染色体11pl5.3是临床上重要的基因丰富区,一些人类的疾病,包括一些不同类型的组织,以及癌症如:膀胱,卵巢,睾丸,乳腺癌和肺癌,均与其有关。STK33蛋白是近年来研究得最为活跃的信号传导通路之一,该通路广泛参与了细胞的生长、分化和凋亡等过程,表明STK33蛋白持续活化发生在数个实体瘤包括肺癌、肾癌、乳腺癌、结肠癌中表达。肺癌是危害人类健康的主要恶性肿瘤,至今还没有一个非常有效的肺癌标志物被确定。Stk33前期研究显示它在肺癌中有高频率的表达,因而STK33的表达可能是肿瘤早期诊断,治疗和判定预后的一个重要的生物标志物。目的分析丝氨酸/苏氨酸激酶33基因(STK33/Stk33)基因在人体肺癌细胞系、乳腺癌细胞系及人正常肺组织、癌旁组织、肺良性病组织、肺癌组织类型、不同分期肺癌、肺癌淋巴结有无转移中的表达情况,探讨STK33基因表达与肺癌发生发展的相关性。探讨丝氨酸/苏氨酸激酶33基因(STK33/Stk33)在肺癌细胞系、乳腺癌细胞系及人正常肺组织、癌旁组织、肺良性病组织、肺癌组织类型、不同分期肺癌中的表达规律及其对肺癌发生发展、预后的意义。方法我们采用实时荧光定量RT-PCR(real-time quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction,real-time quantitative RT-PCR)技术对8大人体肺癌细胞系、乳腺癌细胞系及人正常肺组织、肺癌组织Stk33 mRNA的表达进行定量分析。采用Western-blot技术对此8大肺癌细胞系及人体肺癌组织、正常肺组织Stk33蛋白的表达进行定量分析。采用免疫组织化学染色法对Stk33蛋白在人正常肺组织、癌旁组织、肺良性病组织、肺癌组织类型、不同分期肺癌、肺癌淋巴结有无转移的表达进行定性分析。结果1.实时荧光定量RT-PCR结果显示Stk33与8大肺癌细胞系、乳腺癌细胞系中mRNA的表达量与肺癌细胞系显著相关。2.蛋白质转移吸印技术(Western-blot)结果显示Stk33与8大肺癌细胞系、乳腺癌细胞系中蛋白的表达量与肺癌8大细胞系表达显著相关。3.免疫组织化学染色法结果显示Stk33蛋白免疫组化阳性表达定位于肿瘤细胞及巨噬细胞的胞浆,呈棕黄色颗粒。肺癌组织中Stk33蛋白的阳性率明显高于癌旁及肺良性病变组织,与肺癌的有无淋巴结转移、PTNM分期、组织学分型、细胞分化程度显著相关。124例人体肺的免疫组织化学染色结果显示,在确诊的64例肺癌组织中,Stk33蛋白在肺癌组织及癌旁组织中的阳性率显著高于正常人体肺组织。。在病理诊断有淋巴结转移的肺癌组织中,Stk33蛋白的阳性率显著高于无淋巴结转移的肺癌组织。Pearson相关分析显示Stk33蛋白与肺癌组织、肺癌旁组织、肺癌组织学类型、肺癌细胞分化程度、PNTM分期及有无淋巴结转移的肺癌均存在相关性。肺癌肿瘤周边组织Stk33蛋白表达明显高于肺良性病变组织。
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