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磷脂酰肌醇-3激酶／蛋白激酶B(PI3K／Akt)信号转导通路是近年来发现的一条参与细胞增殖调控的重要信号通路，PI3K和Akt是该通路的中心环节。该通路经生长因子受体活化后，可参与细胞周期的调控，调节细胞生长、增殖以及凋亡等，并参与血管生成、端粒酶活性和细胞侵袭等诸多重要的生命活动过程。研究发现，该通路上的多个基因在肿瘤中存在变异，并且与肿瘤的发生发展有着密切的关系。我们的前期实验中，利用Oligo基因芯片技术建立了胃癌基因表达谱，其中发现PI3Ks和Akt家族在胃癌组织中存在差异表达。通过结肠癌蛋白表达谱的建立，发现了与PI3K／Akt信号转导通路相关的基因Galectin-3以及新基因MFAP3L在结肠癌中表达明显上调。为了重点阐明PI3K／Akt信号转导通路中一组参与肿瘤细胞的增殖、侵袭及转移的相关基因PIK3CA、AKT2、Glaectin-3以及MFAP3L在同一组胃癌标本中的表达情况，并探明PIK3CA、AKT2基因激酶区DNA的变异情况，以期对胃癌发生的病因及肿瘤的临床治疗提供线索。本项研究采用半定量RT-PCR、免疫印迹以及组织微阵列免疫组化等方法验证了这一组基因在胃癌细胞系和胃癌组织中mRNA及蛋白表达水平的变化，并分析了它们之间变化的相互关系。在此基础上，进一步通过变性高压液相色谱技术(DHPLC)以及DNA测序技术筛查了PIK3CA基因以及AKT2基因在胃癌细胞系以及胃癌组织中的突变及多态位点。结果表明，PIK3CA基因在胃癌细胞系及胃癌组织中表达上调[胃癌组织中mRNA表达上调为70％(19／29)，P=0.01]：PIK3CA基因在激酶区的第9外显子1634位点发生A→C的改变(胃癌细胞系，1／10；胃癌组织，0／30)，在第18外显子2730位点存在A→G突变(胃癌细胞系，3／10；胃癌组织，1／30，3.3％)。AKT2在胃癌细胞系及胃癌组织中表达上调[胃癌组织中mRNA表达上调为56％(14／25)，P=0.023]；AKT2基因在激酶区的第6外显子存在A652G多态位点(胃癌组织1／50，2％)，在第6内含子43377位点存在G→C的突变(胃癌细胞系1／10；胃癌组织1／50，2％)，在第9内含子存在A48877G多态位点(胃癌组织9／50，18％)。MFAP3L与Glaectin-3在胃癌组织中表达上调[IHC阳性着色率分别为70.8％(17／24)与64.0％(16／25)，P=0.027与P=0.017]。上述研究表明，PI3K／Akt信号转导通路中与细胞的增殖、侵袭相关的一组基因PIK3CA、AKT2、MFAP3L以及Glaectin-3在胃癌中的表达明显上调。通过基因突变的筛查，发现PIK3CA基因和AKT2基因在激酶区存在突变或多态位点，推测与蛋白激酶的功能改变有关。这组基因在DNA、mRNA及蛋白水平发生的改变可能与胃癌的发生发展有密切关系，与胃癌的生物学行为及临床预后的的关系有待进一步研究。