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[研究背景]目的:淋巴细胞对辐射高度敏感,固有淋巴样细胞(ILCs)是一类具有淋巴细胞形态但缺乏特异性抗原识别受体的免疫细胞,ILCs被认为是先天免疫系统中辅助T细胞的”镜像细胞”,它根据杀伤能力的强弱,分为细胞毒ILCs(NK细胞)和辅助ILCs(ILC1、ILC2、ILC3)。辅助性ILCs存在淋巴器官中,在粘膜和屏障表面富集,也可存在于循环外周血中,作为固有免疫细胞,在免疫反应的早期阶段起着非常重要的作用。近年来,ILCs被公认为免疫稳态和病理学的重要介体,并在人体组织重塑和修复中发挥重要作用。冠心病已经成为全世界慢性非传染性病种中死亡率最高的疾病,动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是冠心病发生的主要原因,脂质代谢障碍为AS的基础。炎症反应存在于动脉硬化的各个阶段,通过淋巴细胞发挥着重要的免疫反应。随着医学干预技术的不断发展,X线透视引导下经皮冠状动脉介入治疗(Percutaneous coronary intervention,PCI)术以创伤小,治疗性好为特点已成为冠心病血管重建的主要方法之一。在各种成像方式中,由于PCI术需要更长的时间,患者承受的辐射剂量也随之增大,介入操作中的放射线暴露已引起越来越多的关注。但是辐射是否会影响冠心病患者在介入治疗过程中的治疗效果一直鲜有关注,例如,ILCs和冠心病之间是否存在直接关系尚不清楚,介入术中X线的辐射暴露是否通过ILCs对冠心病产生影响,也需要进一步研究。本研究旨在探讨冠心病患者在介入术中X线的辐射与ILCs表达率的变化相关性以及该变化可能会给冠心病治疗带来的影响,通过研究以期给冠心病患者提供更好的临床指导,并为研究冠心病的免疫调节机制提供新的思路。[研究方法](1)本研究分别收集14例健康人和20例行介入术的冠心病患者在介入手术前后的外周血,采用鼠抗人单克隆荧光抗体CD45、CD127、CD117、CD294、Lineage(CD3/14/19/20/56/11h/11c)行流式(FCM)检测ILCs表达,并检铡健康人以及冠心病患者(术前)血清中甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)的水平。(2)模拟介入术中相似剂量的X线照射小鼠,流式细胞术检测辐照前后其外周血ILCs表达,同时ELISA检测血清中IL-12水平。(3)高脂饮食喂养APOE-/-小鼠10周,流式检测其外周血ILCs表达;生化检铡X线福照前后APOE-/-小鼠血清中TG、TC、LDL-C水平。[实验研究结果](1)与冠心病(术前)组相比,冠心病(术后)组ILC1表达率上升,ILC3表达率降低:冠心病(术前)组ILC1表达率(89.42±3.21%)ILC3表达率(6.54±2.8%)和冠心病(术后)组ILC1表达率(93.32±3.39%)ILC3表达率(4.42±2.73%)相比,冠心病(术后)组ILC1的表达率升高了 4.4%,ILC3的表达率降低32.4%,差异具有统计学意义,P<0.05。(2)与对照组相比,辐照组小鼠外周血ILC1表达率上升:对照组ILC1表达率(22.8±5.5%)和照射组ILC1表达率(30.5±4.02%)相比,辐照组小鼠ILC1的表达率提高了 33.8%,P<0.05,差异具有统计学意义。同时辐照组小鼠血清中IL-12的浓度较对照组升高,P<0.05,变化趋势与ILC1表达率一致。(3)与健康对照组相比,冠心病(术前)组ILC1表达率上升,ILC3表达率降低:健康对照组ILC1(78.9±4.37%)、ILC3(16.64±6.6%)和冠心病(术前)组ILC1(89.42±3.21%)、ILC3(6.54±2.8%)相比,冠心病(术前)组]LC1表达率升高13.3%,ILC3表达率降低60.7%,P<0.01有统计学差异。(4)冠心病(术前)组血清中的LDL-C、TC、TG水平(分别为4.41±0.12mmol/L,6.86±0.75mmol/L,2.12±0.51mnol/L)均高于健康组水平(分别为 3.78±0.13mmol/L,4.65±0.96mmol/L,1.12±0.5 1mmol/L),P<0.05,差异具有统计学意义;通过对健康对照组和冠心病(术前)组的ILCs和血清中血脂指标低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)行spearman相关性分析,ILC1的表达率与LDL-C、TC、TG浓度呈正相关性(R2分别为0.54,0.79,0.56,P均<0.001)。(5)与WT组相比,APOE-/-组ILC1表达率上升:WT组ILC1表达率(22.8±5.5%)和APOE-/-组ILC1表达率(37.2±2.78%)相比,APOE-/-组小鼠ILC1的表达率提高了 63.2%,P<0.001,差异具有统计学意义。(6)X线对APOE-/-小鼠血清脂质参数TC、TG、LDL-C水平无显著变化。[结论]在ILCs表达已失衡的冠心病患者中,介入术中X线再次使得ILC1表达率上升,这可能增加了冠心病发生发展的风险。