DSF对卵巢癌SKOV3细胞株增殖凋亡的影响

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ivyJZ2009
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在女性生殖器官常见的妇科恶性肿瘤中,卵巢癌的发病率仅次于子宫颈癌和子宫内膜癌,死亡率居首。因其早期常无明显症状,多数发现时已为晚期,且恶性程度高,可以通过腹腔种植、局部扩散、淋巴转移与血行转移等途径转移。目前,卵巢癌治疗的主要原则是手术辅助化疗。手术和化疗对大多数初期患者来说效果显著,但对于多数晚期患者却收效甚微。大数据显示,卵巢癌的发病率在发达国家与发展中国家分别为9.1/10万和5.0/10万[1]。由于铂类和紫杉类的高耐药率使得超过25%的晚期患者在开始治疗后6个月出现复发[2-3]。随着疾病晚期和化疗耐药性的发展,多数患者的平均生存率只有4.5年。尽管已研发出许多靶向治疗卵巢癌的药物,但其价格昂贵,副作用多。一般来说,理想的靶向抗肿瘤药能选择性地杀伤肿瘤细胞,但目前用于抗肿瘤的靶向药物在杀伤肿瘤细胞的同时也会对周围正常细胞造成误伤,对人体产生一些毒副作用。鉴于目前的形式,寻求一种安全有效的卵巢癌治疗方法就显得尤为必要了。双硫仑(Disulfiram,DSF)是一种戒酒药,因其价廉、毒副作用小及安全性好已在临床应用70余年。研究发现:双硫仑可以高效地杀死肿瘤细胞,却不会对周围正常细胞造成影响[4]。因此,科学家大胆推测,双硫仑具有抗肿瘤的效果。DSF是常见的、可与大多数金属形成稳定配合物的含硫配体。铜是人体必需的微量元素之一,是维持生物体正常的生命活动所不可或缺的。研究发现,肿瘤细胞中的铜离子明显高于正常细胞[5-6]。经过大量研究科学家进一步发现:DSF可以和铜离子形成稳定地诱导细胞凋亡的复合物[7]。目的:本文通过体外细胞实验,给予铜(copper,Cu)一定剂量单独应用、不同剂量的DSF及一定剂量的Cu与不同剂量的DSF联合应用,观察人卵巢细胞SKOV3的细胞的形态、数目等变化,探讨DSF/Cu对人卵巢癌细胞SKOV3的抑制增殖作用与诱导细胞凋亡的影响,为卵巢癌的治疗提供新思路。方法:1.细胞培养:在DMEM/H培养基中培养人卵巢癌SKOV3细胞系。条件为37℃、5%CO2。2.实验分组:本实验分为对照组、0.5μmol/LCu组、浓度分别为0.2μmol/L、0.4μmol/L、o.6μmol/L、0.8μmol/L的DSF及上述浓度的DSF联合Cu处理组3.噻唑蓝法(MTT)检测药物干预48h后对细胞的增殖抑制作用4.流式细胞术检测细胞凋亡率5.统计学方法:采用SPSS22.0统计学软件对实验数据进行处理,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.MTT法结果显示,DSF与DSF/Cu对人卵巢癌细胞SKOV3有抑制增殖作用,且受DSF浓度的影响(P<0.05),其中DSF/Cu对细胞抑制增殖作用明显强与单用DSF,差异有统计学意义(P<0.05)。Cu组与空白组比较细胞增殖抑制率差异无统计学意义(P>0.05)。2.流式细胞术显示,0.4μmo L/L的DSF联合Cu作用于细胞48h后与空白组相比,DSF/Cu组细胞凋亡率明显升高,而Cu组与空白组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.DSF与DSF/Cu对人卵巢癌SKOV3细胞均有抑制增殖作用,其中DSF联合Cu的作用明显强与单用DSF。2.DSF/Cu能诱导人卵巢癌细胞SKOV3凋亡。
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