研究背景:高龄妊娠（AMA）是指分娩时年龄达到或超过35岁。我国高龄妊娠的数量及占比逐年攀升,由此带来的子痫前期（PE）、妊娠期糖尿病（GDM）、早产（PTB）以及死胎等相关并发症的风险也随之升高,伴随的母体远/近期健康及围产儿不良结局相关问题日益凸显。目前,诸多文献已证实母体高龄是导致不良妊娠结局的独立风险因素,但深入探讨其基础病因机制的研究却较为匮乏。AMA胎盘所呈现的血管灌注不良、绒毛成熟障碍以及广泛脉管病变等早衰的病理学特征,强烈提示胎盘早衰及滋养细胞功能障碍可能是AMA致不良妊娠结局发生率升高的重要原因。SIRT1是一种NAD+依赖的去乙酰化酶,是目前衰老相关研究的热点分子,但其与胎盘早衰的关系尚未见相关报道。本研究拟应用分子生物学、细胞生物学、药理学等方法,从组织、细胞、个体三个层面探索SIRT1影响胎盘早衰及EMT的分子机制,为降低AMA妊娠不良结局提供潜在靶点。方法:首先,收集高龄妊娠（≥40岁）及对照组（<30岁）妊娠足月胎盘及早孕绒毛组织,通过免疫印迹试验（Western blot）对Sirtuins家族蛋白表达量及衰老相关标志物进行检测。通过免疫组织化学（IHC）及免疫荧光（IF）对SIRT1在早孕绒毛及胎盘中的表达及定位进行明确。通过分别将年轻与高龄的雌雄C57小鼠进行交配建立小鼠AMA模型。其次,通过sh RNA慢病毒转染或使用SIRT1激活剂或抑制剂调控HTR8/SVneo细胞中SIRT1的表达及活性,WB检测衰老相关标志物的表达,并通过侵袭实验及划痕实验对细胞侵袭迁移能力进行评估。将Elf5-Cre和Sirt1fl/fl小鼠交配产生滋养细胞特异性Sirt1-KO小鼠胎盘。最后,使用免疫沉淀-质谱联用法（IP-MS）鉴定出HTR8细胞和人早孕绒毛中与SIRT1结合的蛋白。结果:SIRT1是在AMA和对照组早孕绒毛及足月胎盘中唯一差异表达的sirtuin。SIRT1主要定位于细胞滋养层细胞（CTBs）和绒毛外滋养细胞（EVTs）。SIRT1也在高龄孕鼠胎盘中降低,并且高龄孕鼠胎盘连接层（Jz）明显变窄。SIRT1降低上调P53乙酰化水平,并伴有P21表达水平升高。敲降SIRT1以及使用抑制剂可以减弱HTR8细胞的侵袭迁移能力,而使用SIRT1激动剂可以明显增强HTR8细胞的侵袭迁移能力。Sirt1-KO小鼠胎盘衰老相关标志物表达增多,并且Jz层明显变窄,胎盘重量及胎儿重量明显降低。在滋养细胞中,SIRT1可与波形蛋白相互作用,调节其乙酰化水平并影响滋养细胞上皮-间质转化（EMT）过程。结论:由于滋养细胞SIRT1缺失,高龄妊娠在早孕期就存在胎盘早衰,并且,SIRT1降低促进波形蛋白乙酰化水平升高并抑制滋养细胞EMT过程。因此,SIRT1可能是改善AMA妊娠胎盘发育和围产儿不良结局的潜在治疗靶点。