亮菌口服液工业化生产工艺的优化研究

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亮菌学名假蜜环菌,是一种大型的药用兼食用性真菌。亮菌口服液是亮菌经发酵提取后得到的一款产品,内含有亮菌素、多糖以及氨基酸等多种营养物质并添加蔗糖等的口服液,具有消炎、降酶、解痉等功效,主要用来治疗急慢性肝炎等疾病。目前,诸多企业如合肥诚志生物制药有限公司生产亮菌口服液的主要方式是固体发酵,这种系统生产周期长,容易染菌,发酵完成后培养基中残留的糖浓度高,既影响产品的提取也造成原料的浪费。因此,对合肥诚志生物制药有限公司亮菌口服液的发酵生产工艺进行优化具有一定的意义。本课题以合肥诚志生物制药有限公司提供的亮菌为实验菌种,以该公司提供的培养基配方为基础,针对该公司在生产亮菌口服液过程中的生产工艺条件进行了研究和探讨,从而达到改良、优化的目的。课题主要内容包括:(1)亮菌液体种子的制备及其应用研究;(2)现行工艺下亮菌固体发酵条件的改良;(3)亮菌固体发酵多糖的提取工艺优化;(4)亮菌液体发酵的初步研究。主要研究结果如下:(1)亮菌液体种子的制备及其应用研究结果:通过单因子实验及正交实验得到适合亮菌菌丝体生长的培养基配方为玉米淀粉30g/L,酵母浸出粉3g/L, KH2PO41.5g/L;其次将液体种子和固体种子分别接种到固体培养基上,检测接种不同种子的培养基主要代谢产物含量,结果表明,接种液体种子能提高固体发酵的主要代谢产物的产量。(2)现行工艺下亮菌固体发酵条件的改良结果:通过向现行的固体发酵培养基添加价廉的农副产品、有机氮源及无机盐等添加物,并对发酵后的培养基代谢产物进行检测后发现,具有添加物的培养基内菌丝体生长快,比普通培养基快10-15d,且代谢产物含量要高于普通培养基。(3)亮菌固体发酵多糖的提取工艺优化结果:通过单因子实验及正交实验对亮菌多糖的提取时间、温度、料液比等因索进行了优化,结果表明:在提取温度为90℃,料液比为1:3时,将固体发酵物提取2.5h,提取的亮菌多糖含量高达6.631%。(4)亮菌液体发酵的初步研究结果:以菌丝生物量与发酵液多糖产量确定了亮菌液体发酵的较适合的碳源、氮源,结果为:较适合亮菌液体发酵的碳源为蔗糖与玉米淀粉,蛋白胨与酵母浸出粉的混合物为较适合亮菌液体发酵的氮源,同时发现,碳源的含量能够很大程度的影响亮菌的液体发酵,而氮源含量对亮菌液体发酵的影响不是很大。研究亮菌液体发酵的培养条件时还发现,最佳的工艺条件为:初始pH值为6.0,摇床转速为150r/min,培养温度为25-28℃。这就为该公司亮菌口服液的生产方式由固体发酵向液体发酵转型奠定了基础。亮菌液体种子的制备,固体发酵条件的改良及多糖提取工艺的优化以及亮菌液体发酵的研究,为合肥诚志生物制药有限公司亮菌口服液生产工艺的优化提供参考,具有一定的应用价值。
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