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第一部分:EZH2、IMP3、GLUT-1蛋白在恶性间皮瘤组织中的表达及临床意义[目的]恶性间皮瘤（Malignant mesothelioma MM）是一种少见的间皮源性肿瘤,近年来的发病率日益升高。MM因组织形态复杂,与反应性间皮细胞增生（Reactive mesothelial hyperplasia RMH）、转移癌等多种良恶性病变的鉴别诊断困难。特别在间质浸润无法评估的活检和细胞学标本中,与RMH之间的鉴别更是病理医师面临的巨大挑战。MM与RMH的鉴别手段相对单一,主要是形态学加免疫组化染色辅助,而目前常用的一线抗体敏感性和特异性均难以满足日常工作的需要。本课题拟通过对EZH2、IMP3、GLUT-1蛋白在MM中的表达状况及临床病理意义的研究,初步探讨该组蛋白异常表达在MM发生中的作用及其在判断患者预后中的应用价值,拟为MM的诊断及鉴别诊断提供新的抗体组合,同时为临床判断患者预后提供理论依据。[方法]回顾性分析50例MM及20例RMH病例及其随访数据。应用免疫组织化学SP法检测EZH2、IMP3、GLUT-1蛋白在MM及RMH中的表达情况,探讨本组抗体联合检测在鉴别MM及RMH中的价值,寻找最佳组合。同时采用卡方检验对EZH2、IMP3、GLUT-1蛋白的异常表达与MM临床病理学参数的相关性进行分析,并采用Kaplan-Meier法进行单因素生存分析,时序检验（Log-rank法）比较其差异,探讨与MM患者预后的关系,以P<0.05为差异有统计学意义。[结果]1、50例MM中EZH2、IMP3及GLUT-1蛋白阳性表达率分别为88%（44/50）、60%（30/50）、68%（34/50）,显著高于RMH中的10%（2/20）、5%（1/20）、0%（0/20）,差异有统计学意义（均P<0.05）。2、与单独使用EZH2、IMP3、GLUT-1检测MM比较,EZH2联合IMP3的灵敏度90%、特异度85%,EZH2联合GLUT-1的灵敏度、特异度分别为98%、90%,IMP3联合GLUT-1的灵敏度、特异度分别为84%、95%,差异有统计学意义（均P<0.05）;三种抗体组合中以EZH2联合GLUT-1诊断的灵敏度最高,差异有统计学意义（P<0.05）。3、IMP3在MM腹膜组阳性表达率高于胸膜组的阳性表达率,差异有显著性（P<0.05）;本组数据未发现EZH2、GLUT-1蛋白的表达与MM临床病理学指标间存在统计学相关性（P>0.05）。4、Kaplan-Meier生存曲线进行单因素生存分析,结果显示,IMP3阳性表达组的MM患者生存期显著低于阴性表达组患者（P<0.05）。[结论]1、EZH2、IMP3、GLUT-1在MM中的表达阳性率均显著高于RMH,提示其可能在MM的发生中发挥一定作用,同时提示可作为MM与RMH鉴别诊断指标。2、联合检测EZH2、IMP3及GLUT-1,尤其是EZH2、GLUT-1组合,可提高诊断MM的灵敏度。3、IMP3蛋白的过表达是判断MM患者总生存期的危险因素,对准确判断MM患者预后具有重要临床指导意义。[意义]本课题首次提出联合检测EZH2与GLUT-1,可作为MM与RMH敏感性较强的鉴别诊断指标,为两者的鉴别诊断提供了新的抗体组合。第二部分:EZH2、GLUT-1联合DNA-ICM检测在浆膜腔积液中鉴别良恶性间皮病变的价值[目的]MM早期症状不明显,主要包括浆膜腔积液、胸痛、腹胀,伴或不伴有体重减轻等,多数患者因浆膜腔积液就诊。部分病人难以获得足量组织标本,进而通过胸腹水查脱落细胞明确病变性质,单纯依靠细胞学确诊MM困难很大,尤其高分化的MM与RMH的鉴别诊断更是缺乏重复性高的指标。本研究以第一部分组织病理中EZH2与GLUT-1抗体组合在MM中有较高灵敏度及特异度为依据,探讨细胞块切片联合免疫细胞化学技术检测EZH2和GLUT-1蛋白表达对鉴别MM与RMH的价值,同时探讨EZH2、GLUT-1联合细胞DNA定量分析（DNA image cytometry,DNA-ICM）在浆膜腔积液间皮性病变诊断中的临床价值。[方法]收集山东省单县中心医院2014年1月2019年12月间经组织学证实的胸腹水病例共50例,其中MM 30例,RMH 20例。行细胞块联合免疫细胞化学技术检测EZH2及GLUT-1的表达情况,以活检结果为对照,探讨本组抗体在浆膜腔积液中鉴别MM及RMH的意义,同时行Feulgen染色并DNA-ICM检测,比较免疫细胞化学技术、DNA-ICM及联合检测诊断MM的灵敏度及特异度。[结果]1、EZH2在30例MM中阳性表达率为83%,20例RMH中阳性表达率为25%,表达差异有统计学意义（P<0.05）;GLUT-1在30例MM中阳性表达率为70%,20例RMH中无阳性表达,差异有统计学意义（P<0.05）。2、EZH2、GLUT-1对MM诊断的灵敏度分别为83%、70%,特异度分别为75%、100%,当EZH2、GLUT-1联合检测时,对MM诊断的灵敏度为90%,特异度为75%,与单个抗体比较差异有统计学意义（P<0.05）;3、联合应用免疫细胞化学技术及细胞DNA-ICM灵敏度为97%,显著高于单一方法检测的灵敏度（P<0.05）,特异度为75%,与单一方法比较没有统计学意义（P>0.05）。[结论]联合检测EZH2与GLUT-1,可作为浆膜腔积液内MM与RMH敏感性较强的鉴别诊断指标;结合细胞DNA-ICM技术能进一步提高二者鉴别诊断的灵敏度。[意义]本课题首次提出联合应用EZH2与GLUT-1免疫细胞化学标记,可作为浆膜腔积液内MM与RMH敏感性较强的鉴别诊断指标;结合细胞DNA-ICM技术能进一步提高二者鉴别诊断的灵敏度。