【摘 要】
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近年来已有相关研究证明miRNA参与脂肪细胞分化和脂质代谢方面等调控。本实验选用研究脂肪代谢紊乱疾病成熟的细胞系3T3-L1前脂肪细胞作为研究对象,探究miR-26a-5p对3T3-L1前
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近年来已有相关研究证明miRNA参与脂肪细胞分化和脂质代谢方面等调控。本实验选用研究脂肪代谢紊乱疾病成熟的细胞系3T3-L1前脂肪细胞作为研究对象,探究miR-26a-5p对3T3-L1前脂肪细胞增殖与分化的影响。经化学修饰的miR-26a-5p mimic和miR-26a-5p inhibitor通过脂质体3000对3T3-L1前脂肪细胞进行转染后,采用CCK-8检测其细胞增殖情况以及流式细胞术检测其细胞周期情况;选取细胞周期基因CyclinD1和CDK4以及成脂相关基因C/EBPα和FABP4通过qRT-PCR及Western blot检测其表达情况;运用油红O染色测定其甘油三酯的积累情况。得到以下结果:1.miR-26a-5p调控3T3-L1前脂肪细胞增殖情况:过表达miR-26a-5p抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖,致使细胞周期基因CyclinD1和CDK4在m RNA水平及蛋白水平显著下调;而抑制miR-26a-5p则促进3T3-L1前脂肪细胞增殖,致使细胞周期基因CyclinD1和CDK4在mRNA和蛋白水平分别显著以及极显著上调。2.miR-26a-5p在3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程的表达情况:miR-26a-5p的表达水平呈现时间依赖关系,在3T3-L1前脂肪细胞成脂分化整个过程中显著上调。3.miR-26a-5p调控3T3-L1前脂肪细胞成脂分化情况:过表达miR-26a-5p促进3T3-L1前脂肪细胞的甘油三酯累积,C/EBPα和FABP4在mRNA水平呈显著或极显著上调;抑制miR-26a-5p则呈现相反情况。结论:miR-26a-5p过表达可以通过抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖从而促进其分化为成熟脂肪细胞。
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