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布鲁塞尔酒香酵母(Dekkera bruxellensis)经常被发现存在于葡萄酒中,影响葡萄酒的香气。Dekkera bruxellensis感染葡萄酒的问题已经引起国际葡萄酒行业的广泛关注,相比之下,国内葡萄酒行业仍没有意识到该问题。本研究分析鉴别培养基以及特异PCR扩增对D.bruxellensis分离鉴定的效果,同时利用环介导等温扩增技术建立快速检测D.bruxellensis的方法,对国内部分地区的酒样进行调查;并利用指纹图谱法对各地区的菌株进行基因多样性分析。研究希望能够引起国内葡萄酒行业对该问题的重视,并为D.bruxellensis的研究以及快速检测提供技术支撑。主要研究结果如下:1、鉴别培养基DBDM(Dekkera bruxellensis differential medium)结合特异PCR扩增能够准确对D.bruxellensis进行分离鉴定。WLN培养基(Wallerstein Nutrient medium)也能分离D.bruxellensis菌株,但其出现的杂菌菌落较多,相比之下,DBDM培养基的分离效果相对较好。2、建立了快速检测D.bruxellensis的环介导等温扩增方法。以5.8S-ITS-18S序列为靶基因设计引物,其能够特异性的检测D.bruxellensis基因组DNA,且能得到15 pg/μL的检测浓度阈值。3、对我国5个地区的葡萄酒样品进行D.bruxellensis的检测分析,在河北、山东和吉林产区的葡萄酒中检测到D.bruxellensis,尤其是陈酿在橡木桶中的葡萄酒,国内葡萄酒行业存在D.bruxellensis污染问题。4、对3个地区的D.bruxellensis菌株利用指纹图谱法分析基因多样性。利用随机引物PCR对收集到的菌株进行指纹图谱分析,共得到12种不同基因型的菌株,有4个基因型的菌株出现在两个地区中,没有三个地区均出现的基因型菌株;每个地区的菌株都存在自己独特的基因型菌株。