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口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)是一种发病机制尚不明确的非感染性粘膜病,组织病理以基底细胞液化变性和固有层浅层淋巴细胞带状浸润为特点。近年来研究发现以T细胞介导的细胞免疫反应参与了OLP的发病,而细胞免疫反应和抗原递呈细胞(antign-presenting cell,APC)功能状态关系密切。朗格罕细胞(Langerhans cell,LC)是一种分布于表皮、粘膜中的树突状细胞(dendritic cell,DC),具有启动初始T-淋巴细胞反应的巨大潜力,是粘膜、表皮中专职的APC。有关OLP发病过程的研究资料国内报道不多,LC在OLP发病中的可能作用还不清楚。本文采用免疫组化和形态定量技术,观察OLP病变中的LC数量、形态变化以及浸润淋巴细胞的性质,为探讨LC在OLP发病中的作用提供实验依据。 材料和方法 41例OLP标本均选自郑州市口腔医院存档的经福尔马林固定,石腊包埋的腊块,其中包括单纯型16例,糜烂型25例,并以7例正常粘膜作为正常对照。同时采用Piboonniyom临床评分系统量化每例OLP病损程度。采用免疫组化Elivision法,以抗CD1a、HLA-DR单克隆抗体标记LC,以CD3、CD45RO标记T淋巴细胞;应用图像分析系统检测上皮层和固有层阳性细胞平均灰度、面积和周长的变化,探讨LC的数量、形态、表面抗原的变化以及浸润淋巴细胞的性质;结合OLP病程、病损程度进行统计学分析。结果1.Piboonniyom临床评分系统量化oLP病损程度:oLP病变标本中,单纯型平均病损程度9.53士2.44;糜烂型平均病损程度14.82士4.66;两型平均病损程度差异有显著性(P<0.01)。2.CDla阳性LC在正常组及OLP组的形态、分布及数量:OLP组与正常组相比CDla阳性LC的分枝状突起增多增长,分布趋向上皮表层,甚至可达角化层;在上皮分布相对较均匀,在固有层呈散在分布,可观察到LC与淋巴细胞毗邻及密切接触现象。正常组和单纯型、糜烂型OLP的CDla阳性LC数量分别为2.51士0.60,5.10士2.91和8.42士3.01,两两之间差异有显著性(p<0.01)。正常组和单纯型、糜烂型OLP上皮层CDla阳性Lc的平均灰度值分别为190.12士14.62,148.59士20.93和146.20士23.26(灰度值小,着色强),正常组和单纯型、糜烂型oLP差异有显著性(P<0.05)。单纯型、糜烂型QLP较正常组上皮层CD la阳性朗格罕细胞平均面积及平均周长增大,组间差异具有显著性(P<0.05)。3,正常组及OLP组中CD la、HLA一DR阳性LC数量比较及HLA一 DR阳性细胞平均灰度值比较:正常组和单纯型、糜烂型OLP组中CD la、HLA一DR阳性LC数量分别为2.91士0.34和1.89士0.47;7.60士4.30和2.93士1.05;11.18士4.34和4.53士1 .52;正常组中CDla、HLA一DR阳性LC数量差异无显著性(p>0.05),OLp组中CDla、HLA一DR阳性LC数量差异有显著性(P<0.01)。郑州大学2003年硕士学位论文朗格罕细胞在口腔扁平苔鲜发病中的作用和意义正常组和单纯型、糜烂型OLP中HLA一DR阳性细胞平均灰度值分别为1 65 .99士15.54,103.05士11.61和98,67士16.65(灰度值小,着色强),正常组和单纯型、糜烂型组间差异具有显著性(P<0.01);而糜烂型和单纯型阳性细胞的灰度值组间差异无显著性(P>0.05);部分角质形成细胞和T细胞亦可见HLA一DR阳性表达。4.CD3、CD45RO阳性淋巴细胞的分布及数量:OLP病损区域以CD3、CD45RO阳性淋巴细胞为主,尤其在基底膜严重破坏区,CD45RO阳性淋巴细胞聚集更为明显。单纯型和糜烂型CD3、CD45RO阳性淋巴细胞数量分别为38.03士21.33和44.41士17.11;46.61士26.35和69.52士14.56,两型之间CD3阳性淋巴细胞数量差异无显著性(P>0.05);而两型之间CD45RO阳性淋巴细胞数量差异有显著性(P<0.01)。5.CDla阳性LC数量和病程无相关性(P>0.05),和病损程度有相关性rs二0.372(P<0.05);HLA一DR阳性细胞平均灰度值和病程无相关性(P>0.05),和CD la阳性LC数量有相关性:=·0.473(P=0.001);CD45RO阳性淋巴细胞数量与OLP病损程度有相关性rs=0.543(P<0.01),与病程无相关性(P>0.05)。结论1.OLP中的LC数量增多且趋向成熟,功能活跃;CDla单克隆抗体标记LC,特异性强,标记可靠。2.OLP中CDla、HLA一DR抗原表达增强,部分角质形成细胞和T淋巴细胞呈HLA一DR阳性表达;表明HLA一DR分子在免疫应答中起关键作用。3.不同病程OLP中LC数量是不稳定的,病损活跃期LC数量趋于增多;对于临床治疗使用免疫抑制剂有指导作用。郑州大学2003年硕士学位论文朗格罕细胞在口腔扁平苔辞发病中的作用和意义4.OLP上皮层和固有层中LC形态有所变化,与LC迁移过程中功能改变有关。5.OLP组中CDla、HLA一DR阳性LC数量有差异,可能是HLA一DR分子参与抗原递呈过程有所消耗的缘故。6.OLP中LC可能在局部直接激活初始T淋巴细胞,提示临床中以局部治疗为主。7.Pib。。nniyom临床评分系统可准确地反映不同类型OLP的病损程度。