水稻幼苗温敏感叶色突变基因tsl11的定位与功能初步分析

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叶色突变体是水稻中常见的一种突变体,在水稻功能基因组研究中具有重要的应用价值。目前已发现的水稻叶色突变材料虽然很多,但得到克隆的基因还很少,并且有些基因的具体功能和调节机理还不清楚,说明对水稻叶色突变基因的研究还有很大的空间。加强水稻叶色基因的功能和调控机理研究,对于水稻叶色突变在生产上应用和揭示光合作用机理具有重要意义。本研究对一个新的水稻幼苗温敏感叶色突变体tsl11进行了图位克隆与基本分析,研究后得到以下结论:a.突变体tsl11的温敏感表现为:在低于24℃的条件下,tsl11的第3叶、第4叶表现为黄化,5叶期后开始叶色恢复正常;而在32℃条件下,tsl11的叶色与野生型表型一致。b.20℃条件下tsl11叶绿素含量与野生型嘉花1号相比下降极其显著,但在32℃时与野生型差异不明显。另外,在20℃时的tsl11的叶绿体发育严重不良,但在32℃时叶绿体发育正常。田间调查结果发现,在移栽第四周之前株高与田间叶绿素SPAD值均低于野生型,穗数、穗长、千粒重等农艺性状指标并没有明显下降。c.遗传分析表明的突变体低温黄化性状是由一个隐性核基因(tsl11)控制,构建tsl11与培矮64S的杂交F2代定位群体,将tsl11基因定位在水稻第11号染色体长臂端,物理距离147Kb,对区间内的所有编码蛋白的预测基因全部测序,测序结果显示只有基因LOC-Os11g26150下游3’端离终止密码子相距1000bp位置缺失了两个碱基“TA”,而阻碍基因正常转录。d.对TSL11基因与叶绿素合成及叶绿体发育相关基因在tsl11及其野生型在转录水平进行检测的结果显示:20℃条件下基因TSL11在突变体中表达严重上调,高温下表达量与野生型相比差异不大;TSL11基因突变后可能直接影响调控叶绿体早期发育相关基因(如OsPOLP基因)的表达。另外,组织表达分析发现TSL11基因在幼叶中表达量最高。本研究发现了一个新的水稻幼苗温敏感叶色突变基因tsl11,对该基因的功能进行了初步分析,将有利于后期基因功能的深入研究,同时有助于我们进一步研究水稻早期温度调控叶绿体发育分子机理。
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