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目的： 结直肠癌是最常见的消化系统恶性肿瘤之一，近年来，其发病率和死亡率仍居高不下，因此深入研究结直肠癌发生、发展的机制具有极其重大的意义。研究发现在果蝇和线虫中，NIT1基因和FHIT基因的表达产物是以一种融合蛋白NitFhit的形式存在，而这个融合蛋白NitFhit在机体调控细胞增殖和凋亡的过程中有着非常重要的作用。研究表明在人类和小鼠中FHIT基因扮演着抑癌基因的角色，故推测NIT1可能也发挥着类似的作用。目前为止，关于NIT1在肿瘤中的作用及其分子机制的研究极少，对NIT1在结直肠癌中的研究目前尚未见报道。本研究旨在探讨NIT1在结直肠癌中的表达情况并分析NIT1表达水平与多个临床相关病理参数之间的关系;探讨NIT1在结直肠癌中的体内外功能作用及其相关的分子机制;探讨NIT1表达的上游调控机制。 方法： 1.利用公共数据库(Oncomine和GEO)分析NIT1在结直肠癌中的表达; 2.利用荧光实时定量PCR（Real-time quantitative PCR，qRT-PCR）、免疫印迹(Western blot)和免疫组织化学(Immunohistochemistry，IHC)检测结直肠癌新鲜组织样本和石蜡样本中NIT1的表达，并分析其与相关临床病理参数之间的关系; 3.建立NIT1稳定过表达和干扰结直肠癌细胞株，通过CCK8细胞增殖实验、平板克隆形成实验和裸鼠皮下成瘤实验探讨NIT1的体内外功能; 4.运用GSEA基因富集方法分析NIT1高表达组和低表达组中细胞周期和凋亡相关通路的富集情况，通过流式细胞术和Western blot实验检测NIT1对细胞周期分布和凋亡的影响; 5.在线预测可能与NIT1存在相互作用的蛋白，通过免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation，Co-IP)实验验证NIT1与SARA、SMAD2/3的相互作用，并利用Western blot实验验证TGFβ1-Smad2/3通路的激活情况; 6.通过双荧光素酶报告基因、染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation，ChIP)和Western blot实验探讨NIT1的上游调控机制，同时利用qRT-PCR技术验证NIT1和转录因子SMAD3的表达相关性。 结果： 1.NIT1在结直肠癌中表达下调，且其表达水平与结直肠癌的分化程度以及是否有浆膜浸润呈负相关关系;NIT1低表达对结直肠癌预后不良; 2.NIT1可以抑制结直肠癌细胞的体内外增殖; 3.NIT1可以诱导细胞周期G0/G1期阻滞和诱导caspase3依赖性凋亡; 4.NIT1可能通过与SARA和SMAD2/3相互作用，将Smad2和Smad3招募到TGFβ受体激酶上进行磷酸化，从而激活TGFβ-Smad2/3信号通路; 5.SMAD3可以促进NIT1的转录;SMAD3和NIT1在表达水平上存在显著的正相关关系。 结论： NIT1可能通过与SARA和SMAD2/3相互作用从而激活TGFβ-Smad2/3信号通路，而在TGFβ1的诱导下或在SMAD3的转录调控下又可以驱动NIT1的表达水平增加，因此，NIT1对TGFβ-Smad通路的激活就形成了一个正反馈环路，NIT1的高表达可以导致TGFβ-Smad2/3信号通路的持续激活，从而起到抑制结直肠癌细胞增殖的作用。本研究为结直肠癌的治疗和预后评估提供了新的思路。