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羊支原体性肺炎是山羊和绵羊最为常见的一种呼吸道疾病，但由于它的死亡率比较低，一直以来并不引起人们的重视，从近年来的研究发现，该病的死亡率呈上升趋势，尤其是羔羊，在世界上多个国家地区普遍流行，造成巨大经济损失，对养羊业危害严重，同时国内外对于绵羊肺炎支原体的致病机理、分子生物学等方面的研究还进展缓慢。本文以绵羊肺炎支原体标准株Y98和丝状支原体丝状亚种标准株PG3为试验材料，建立了针对这两种支原体蛋白质组学研究的双向电泳(2-DE)及其相关技术体系，并通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)免疫印迹试验对绵羊肺炎支原体标准株Y98的抗原性进行了初步探索，旨在从构建绵羊肺炎支原体总蛋白的蛋白质组学双向电泳图谱入手，为今后肽质量指纹图制备及抗原基因的获得等分子生物学研究打下基础，为将来绵羊肺炎支原体基因工程疫苗的研究作铺垫，从而希望能从根本上控制该病的传播与流行。 SDS-PAGE结果显示：绵羊肺炎支原体标准株Y98全蛋白的分子量范围为14kD～100kD，主要的9种蛋白质带分子量分别为100kD，97kD，82kD，74kD，48kD，40kD，35kD，22kD，18kD；绵羊肺炎支原体分离株HD-1全蛋白的分子量范围为14kD～100kD，主要的10条蛋白质带分子量分别为100kD，97kD，82kD，74kD，48kD，44kD，40kD，35kD，22kD，18kD，与Y98蛋白带基本相同；丝状支原体丝状亚种标准株PG3全蛋白的分子量范围为15kD～123kD，主要的11条蛋白多肽带分子量分别为123kD，105kD，73kD，70kD，62kD，38kD，30.6kD，29kD，27.8kD，23.5kD，15.6kD，与Y98和HD-1的蛋白带差异明显；肺炎支原体标准株FH全蛋白的分子量范围为14kD～100kD，主要的9条蛋白多肽带分子量分别为97kD，79.4kD，75.9kD，65kD，63kD，53.6kD，38.2kD，30，17kD。可见HD-1和Y98菌体蛋白分子量基本相同，只有少数多肽不同，它们与MP的菌体蛋白也有很多相同的条带，但是它们与PG3的菌体蛋白相差很大。 蛋白质组学双向电泳图谱显示：绵羊肺炎支原体标准株Y98株菌体蛋白双向电泳银染图谱出现288±9个蛋白质点，分子量范围为14kD～100kD，等电点范围主要为pI4.436～7.164，说明Y98株菌体蛋白主要为偏酸性蛋白；丝状支原体丝状亚种标准株PG3菌体蛋白双向电泳银染图谱出现243±11个蛋白质点，分子量范围为14kD-100kD，等电点范围主要为pI 4.213～7.987，同样说明PG3菌体蛋白中偏酸性蛋白占主导；利用Image Idster 2D Elite 3.01图像分析软件分析Y98总蛋白双向电银染图谱和PG3双向电泳银染图谱，我们发现两者具有21个相近的蛋白质点，可能为两者的共同蛋白质。绵羊肺炎支原体标准株Y98全蛋白免疫印迹试验初步确定Y98具有抗原性的四种蛋白为分子量分别为74.2kD、53.6kD、40.5kD和26.5kD的蛋白质，可能为Y.98的主要抗原蛋白，进一步确认需要更进一步的深入研究。