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本研究比较了福建省五种红藻资源中藻胆蛋白的含量,选择藻红蛋白含量最高的红毛菜作为提取材料。为充分释放红毛菜中的藻红蛋白,本研究比较了五种不同的提取方法,分别为冻融法、双酶解法、单酶解法(纤维素酶和果胶酶)、振荡法和超声法。结果显示双酶解法能够从红毛菜中提取出更多的藻红蛋白。为确定双酶解法的最优提取条件,对其做进一步单因素优化。结果为固液比1:50,提取时间5 h,提取2次,最终获得藻红蛋白34.4 mg/g,纯度为0.23。采用10 kDa分子量的中空纤维膜对藻红蛋白粗提取液进行超滤浓缩,获得纯度为1.10的藻红蛋白浓缩液。浓缩液经饱和度分别为25%和45%的(NH4)2SO4沉淀,获得纯度为1.40的藻红蛋白预处理液。为获得纯度更高的藻红蛋白,本研究比较了四种不同的层析色谱柱,最终选择DEAE Sepharose FF纯化藻红蛋白。采用0.01 mol/L的PBS缓冲液(pH7.0,含0-0.6mol/LNaCl)进行线性洗脱,最终得到纯度为3.11的医药级藻红蛋白。纯化获得的藻红蛋白采用SDS-PAGE进行表征。SDS-PAGE分析结果显示,红毛菜藻红蛋白含有两种不同的亚基,即a和p,分子量为15.0 kDa和19.5 kDa,并未发现γ亚基。光谱图呈现三个特征吸收峰,分别为500、557和617 nm。荧光光谱图则有两个发射峰,分别为574和640 nm。本研究评估了红毛菜藻红蛋白的抗氧化活性,综合分析了藻红蛋白清除DPPH自由基、超氧自由基、羟自由基的能力以及总还原能力。结果表明藻红蛋白有着较好的抗氧化活性,其中清除DPPH自由基的IC50值为0.30 mg/mL,清除超氧自由基的IC50值为0.26 mg/mL,清除羟自由基的IC50值为2.60 mg/mL。研究发现pH、温度、光线等会影响藻红蛋白的稳定性。红毛菜藻红蛋白在4-30℃,pH 3-9,避光的条件下能够保持较好的稳定性。本研究初步探索了红毛菜藻红蛋白在荧光探针方面的应用,建立起快速检测的模型。该模型是以二极管为激发光源,光线透过滤光片,使得557 nm波长下的光线对红毛菜藻红蛋白进行照射,即为激发。藻红蛋白因此发射出具备特定波长的荧光。荧光信号透过能够滤过特定波长的窄带滤光片后,被微型照相机记录。经过一系列探索,建立起藻红蛋白浓度与荧光强度RGB值之间的线性关系式,R2达到0.9962,最低检测限为0.04 mg/mL。这为藻红蛋白作为荧光探针的快速检测奠定了基础。