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惊厥是最常见的神经系统症状之一,儿童时期的发病率明显高于成年期,尤其以一岁以内的小儿惊厥发病率最高。临床实践表明,小儿与成人惊厥的发生发展过程有所不同,包括惊厥的行为特征、脑电图的变化及惊厥的预后等。儿童惊厥持续状态的发病率远远高于成人,而且可能对远期惊厥易感性、学习记忆、行为等造成影响。近年来,亚低温(32℃~34℃)的脑保护研究尤其引人注目,大量动物实验和临床研究证明,亚低温可以降低脑能量利用率和脑耗氧量,增强细胞对缺血缺氧的耐受性,有良好的脑保护作用。我们的实验研究亚低温期前干预对于幼鼠惊厥持续状态模型惊厥发生潜伏期,皮层脑电以及海马区神经元凋亡的作用。
第一部分
目的:亚低温期前干预对于幼鼠惊厥发生潜伏期和惊厥持续状态开始时间的影响。材料和方法:本实验采用51只Wistar三周龄雄性幼鼠体重54-66g(平均60g)。随机分成两组:(1)正常对照组(n=26)(2)亚低温组(n=25)将实验幼鼠放入隔热温度控制箱适应至少30分钟后,记录幼鼠基础体温至少5分钟,由温度控制器使实验鼠的体温控制在33℃,在达到预期温度后,两组实验鼠被腹腔注射pilocarpine 380mg/kg 诱发。产生惊厥持续状态。观察并记录两组幼鼠惊厥发生的潜伏期和惊厥持续状态开始的时间,实验鼠的生存率、死亡率。结果:亚低温能够延长惊厥潜伏期和惊厥持续状态开始的时间,但是对于改善惊厥持续状态幼鼠的生存率没有显著作用。
第二部分
目的:亚低温期前干预对惊厥持续状态的幼鼠皮层脑电的影响。材料和方法:本实验采用12只Wistar三周龄雄性幼鼠体重54-66g(平均60g)。随机分成两组:(1)正常对照组(n=6)(2)亚低温组(n=6),全部手术种植电极并且进行皮层脑电记录。将亚低温组实验幼鼠放入隔热温度控制箱适应至少30分钟后,记录幼鼠基础体温至少5分钟,由温度控制器使实验鼠的体温控制在33℃,在达到预期温度后,两组实验鼠被腹腔注射pilocarpine 380mg/kg。产生惊厥持续状态。观察、记录、分析两组数据并比较pilocarpine注射后四个时段0-30 min,30-60min,60-90 min,90-120 min的棘波频率(spike frequency)和棘波面积差异(⊿Area)。结果:各个时间段亚低温组的棘波频率(spike frequency)和棘波面积差异(⊿Area)均低于对照组(p<0.05),并且在0~30min和30~60min 时间段差异尤为明显(p<0.01)。
第三部分
目的:亚低温期前干预对惊厥持续状态的幼鼠海马区神经细胞凋亡的影响。材料和方法:本实验采用9只Wistar三周龄雄性幼鼠体重54-66g(平均60g)。随机分成两组:(1)正常对照组(n=5)(2)亚低温组(n=4),将实验幼鼠放入隔热温度控制箱适应至少30分钟后,记录幼鼠基础体温至少5分钟,由温度控制器使实验鼠的体温控制在33℃,在达到预期温度后,两组实验鼠被腹腔注射pilocarpine 380mg/kg,于惊厥发生后两小时予戊巴比妥终止惊厥发作。惊厥终止后7天,对实验鼠进行灌注取脑,并观察切片海马部位神经元凋亡的情况。结果:亚低温组在海马CA1、CA2、CA3区神经元凋亡率明显小于对照组。结论:亚低温期前干预能够延长惊厥发生的潜伏期和惊厥持续状态开始的时间;减少棘波频率和棘波面积差异;降低海马CA1,CA2,CA3区神经元凋亡。