5种药物对HPV感染裸小鼠模型免疫反应的影响

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:fh2019
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[目的]目前临床上常用的用于治疗并预防尖锐湿疣复发的药物有咪喹莫特、干扰素及派特灵等,本实验建立了HPV感染的动物模型,目的是研究派特灵、咪喹莫特、重组干扰素α-2b喷雾剂(假单胞菌)、三白洗剂、除疣煎液对HPV感染小鼠的免疫激发作用。[方法]选取体重15-20g、4-6周龄BALB/C雌性裸小鼠随机分成空白对照组、阴性对照组、咪喹莫特组、重组人干扰素α-2b喷雾剂(假单胞菌)组、1:20派特灵组、1:2派特灵组、三白洗剂组、除疣煎液组。将取自病人的尖锐湿疣疣体(分泌物HPV分型为HPV6,HPV31,HPV81,患者已知情同意,疣体大小为0.5cm^3)种植在裸鼠右侧背部皮肤下,21天后动物模型构建成功。空白对照组不接种尖锐湿疣疣体,无药物干预;阴性对照组接种尖锐湿疣疣体,无药物干预;1:2派特灵组、1:20派特灵组、重组人干扰素α-2b喷雾剂(假单胞菌)组、三白洗剂组、除疣煎液组均每日早晚两次于疣体处用药;咪喹莫特组隔日用药一次于疣体处。共计14天。动物实验期间每天观察小鼠背部疣体移植区皮肤的变化,实验完成后,处死小鼠,取小鼠眶动脉和眶静脉血,分离血清,采用MSD试剂盒检测IFNγ、TNFα、IL-2、IL-12表达水平。取小鼠疣体种植处组织,石蜡包埋做病理切片。做HE染色,观察各组凹空细胞变化趋势。做CD207免疫组化,比较各组朗格汉斯细胞数目变化。取疣体组织采用总RNA提取试剂盒提取RNA,反转录成DNA做多重荧光定量PCR检测病毒载量。[结果]与阴性对照组相比,治疗组TNFα,IL-2,IFN-γ和IL-12p70因子水平均明显升高;在HE和免疫组化中,治疗组中的凹空细胞显著低于未处理组,朗格汉斯细胞数目增加,CD207阳性表达更显著,治疗组的HPV病毒载量也明显下降,尤其是咪喹莫特组和派特灵组。[结论]在感染HPV6、31和81的裸鼠中,使用咪喹莫特、干扰素α-2b喷雾剂(假单胞菌)和派特灵、三白洗剂、除疣煎液治疗均可增强免疫应答,降低病毒载量,其中咪喹莫特和派特灵效果优于其他药物。
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