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全球水产业每年因无乳链球菌(SStreptococcus agalactiae/group B Streptococcus,GBS)病的流行性暴发造成了惨重的经济损失,罗非鱼是GBS的易感宿主之一,而近年来引起我国养殖罗非鱼暴发该疾病的GBS又以Ia型为主。人们通常使用抗生素对罗非鱼GBS病进行防治,随着抗生素带来的问题日益严重,人们开始研制或者找寻更有效、更安全的新型药物来替代抗生素。在寻找抗生素替代品的过程中,卵黄抗体(immunoglobulin of egg yolk,IgY)由于生物学上不激活补体,不与Fc受体和人类风湿因子结合,可与异源抗原上的更多表位发生反应等高特异性优势；以及制备上成本低、产出率高、提纯简便快捷,并具有耐酸碱、稳定性好等优点,引起了许多研究人员的兴趣。本研究以I。型菌株GBS/HN0303为抗原免疫蛋鸡,采集免疫蛋；采用氯仿法与饱和硫酸铵盐析法结合的方式制备特异性IgY。运用玻片凝集试验、免疫印迹(WB)、细菌特异性染色、酶联免疫吸附试验(ELISA)与试管凝集试验等方法,从定性到定量,对所得IgY抗体特性、在蛋鸡体内免疫应答情况及其理化性质进行检测；并通过／.外抑菌与体内抗病试验对其抗菌效果进行评价。1.IgY制备效果及理化性质本研究以1×109CFU/mL菌液制成的全菌灭活疫苗,可引起蛋鸡较好的免疫应答,经过四次免疫后,鸡蛋中的IgY可以达到较高的浓度；经间接ELISA测定,鸡蛋中IgY抗体水平峰值出现于四免后第48d,可以达到1：100000,并可维持至少一个月时间。通过玻片凝集、特异性染色及免疫印迹等试验,证明sp-IgY具有较高结合活性；另外在低温环境下储存IgY活性稳定,且在pH3-7范围内,IgY抗体活性良好。2.IgY的体外抑菌能力在液体环境中,sp-IgY的抑菌效率明显,28℃下孵育,500μg/mL的sp-IgY可成功抑制等体积1×105CFU/mL的GBS/HN0303生长达12h：在固体培养条件下,sp-IgY抑菌效果与其特异性组分含量正相关,含量越高,抑菌效果越佳,呈现出明显的量效关系；还证明了sp-IgY在鱼体内对GBS/HN0303具有中和能力。3.IgY的体内抗病能力以罗非鱼为模型动物,检验了所制备IgY的防治功效。总体上,都表现出了对罗非鱼免疫增强的作用,具体体现为攻毒后延缓罗非鱼发病进程,其中sp-IgY组较对照组有效降低了累计死亡率,表现出了其具有特异性抗病能力；而将sp-IgY拌料口服免疫时,随着饲料中sp-IgY含量的升高,其免疫保护率亦随之上升,最高免疫保护率可达46.7%,证实sp-IgY在体内发挥抗病作用时,依旧存在量效关系。综上所述,本研究制备的罗非鱼源GBS特异性IgY具有一定保护作用,可将其作为一种新型的罗非鱼抗菌免疫制剂。