论文部分内容阅读
脂质过氧化作用是由机体产生的活性氧自由基与生物膜磷脂中PUFA反应引发的。脂质过氧化与肿瘤、炎症、自身免疫疾病、胃肠疾病、帕金森症、心血管疾病、糖尿病以及机体衰老等生理过程有密切的关系。当活性氧超出机体清除平衡能力时,机体需补充适当的含抗脂质过氧化活性物质的食品或药品来抵御活性氧对机体造成的伤害。自然界中的植物和真菌是重要的抗脂质过氧化活性物质来源。本课题以双向发酵为基础,采用现代发酵技术,利用红曲霉发酵金钗石斛以研究和开发二者发酵的药性菌质抗脂质过氧化活性物质。以期药性菌质大于二者不经发酵的简单混合叠加的抗脂质过氧化能力,探讨是否有新的抗脂质过氧化物质生成。本课题采用红曲霉与金钗石斛进行双向发酵,对三株不同红曲霉菌株的药性菌质运用体外抗氧化实验,筛选能产生具有较高抗氧化活性物质的红曲霉菌株。对筛选后得到的红曲霉菌株的药性菌质的生物碱、多糖和多酚的含量进行了分析比较;采用生物活性追踪的方法,对抗脂质过氧化成分提取及活性分布进行研究;利用柱层析的方法将粗提品进行分离,得到不同的具有抗脂质过氧化活性的组分。并经进一步硅胶柱层析分离纯化得到具有抗脂质过氧化活性的单体。经鉴定为化合物X。主要研究结果如下:1、体外模型筛选抗脂质过氧化菌株,确定能产生具有较高抗氧化活性物质的菌株为红曲霉菌株GZUM-457。对红曲霉发酵金钗石斛药性菌质的多糖、多酚和生物碱含量分析,药性菌质、发酵红曲和金钗石斛的多糖总量分别是3.15、2.41和1.73 mg/g。药性菌质、发酵红曲和金钗石斛的多酚含量分别是2.03、1.5和0.08μg/g。药性菌质、发酵红曲和金钗石斛的生物碱含量分别为1.79、2.79和1.22 mg/g。2、以体外抗脂质过氧化模型为指标,采用不同极性的溶剂对药性菌质进行提取及萃取。研究结果表明,溶剂A和B4为药性菌质最佳提取溶剂,药性菌质抗脂质过氧化活性较强部位为B4提粗品的E萃取部位。3、对A提和B4提的药性菌质提取物采用柱层析进行分离纯化,A粗提品洗脱剂为溶剂E和溶剂H,由纯溶剂E到纯溶剂H进行梯度洗脱;B4粗提品洗脱剂比例为溶剂F、溶剂E和溶剂H,由纯溶剂F到纯溶剂H进行梯度洗脱,得到六个组分,并对各活性组分进行进一步分离纯化,从组分二中得到结晶单体。4、采用质谱(mass spectra,MS),核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)波谱技术鉴定结晶单体为化合物X。