基于金属纳米材料的光学生物传感技术用于酶活性的检测

来源 :湖南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wanganInsh888
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
最近几年,随着纳米技术的发展,出现了各种各样的纳米材料,如金纳米颗粒、量子点、磁性纳米颗粒和金属纳米簇。由于它们独特的物理、化学、力学、磁性和光学特性,所以被成功应用于生物传感器中。基于纳米材料的生物传感器是材料科学、分子工程学、化学和生物技术的综合产物,它能极大地改善生物分子检测的灵敏性和特异性,可应用在许多方面,如生物分子识别、致病原诊断和环境监测等。本文将金纳米颗粒、银纳米簇和铜纳米簇这些新颖的金属纳米材料与光学转换器件结合,对地衣芽孢杆菌蛋白酶、胆固醇和碱性磷酸酯酶进行了灵敏的检测。具体内容包括:(1)基于金纳米颗粒的凝集变色特性开发了一种简便、快速的比色方法用于地衣芽孢杆菌蛋白酶的检测。在本文中,设计用于检测地衣芽孢杆菌蛋白酶的多肽底物两端含有半胱氨酸残基,中间含有两个能被目标蛋白酶特异性识别的D-亮氨酸残基。多肽底物两端半胱氨酸残基中的巯基可以与金纳米颗粒通过金-硫键的作用结合起来,引起金纳米颗粒的凝集,从而导致纳米金溶液颜色由红色变为蓝色;在目标蛋白酶地衣芽孢杆菌蛋白酶存在下,该蛋白酶通过识别D-亮氨酸残基将多肽底物切断,从而不会引起金纳米颗粒的凝集,溶液颜色仍为红色。该方法在0.15μg/mL地衣芽孢杆菌蛋白酶浓度范围内与A520/A600的吸光度比值呈线性关系,所得检测下限为0.09μg/mL。与传统的分析检测方法相比,该方法具有简单、快速、选择性高等优点。(2)基于3′端带有两个G碱基的DNA链为模板合成的具有荧光的银纳米簇(G-DNA-Ag NCs)发展了一种新颖的荧光检测方法用于酶解底物胆固醇的检测。此方法中,胆固醇在胆固醇氧化酶的作用下与溶解的氧气反应生成H2O2,利用所产生的H2O2的量对G-DNA-Ag NCs荧光信号猝灭的多少来间接检测胆固醇的含量。G-DNA-Ag NCs荧光信号的减少与胆固醇浓度的高低正相关,在线性检测范围为0.20200M时,此方法的检测限为0.15M。我们设计的这一方法操作简单,其选择性很好。此外,这一方法对于能与氧化酶反应产生H2O2的其它底物提供了很好的平台,这一平台对于复杂生物学体系中氧化酶的检测提供了可能性。(3)基于双链DNA为模板合成了具有荧光的铜纳米簇(Cu NCs),发展了一种新颖的荧光无标记信号增强型检测碱性磷酸酯酶(ALP)活性的方法。该方法中,利用ALP的天然底物焦磷酸(PPi)与Cu2+之间的强烈相互作用,阻碍荧光Cu NCs的有效形成,从而导致荧光信号的降低。在目标分析物ALP存在时,由于其对PPi的水解,妨碍了PPi和Cu2+之间的螯合作用。然后,在双链DNA作为模板的条件下,通过抗坏血酸的还原,荧光Cu NCs有效的形成了,荧光强度也得到恢复,荧光的增强与ALP的浓度大小相关。当ALP浓度范围在0.12.5nM时,此方法的检测下限为0.096nM。该方法操作简便,无需任何化学标记,并且具有较高的灵敏度和选择性。此外,它也适用于复杂生物学体系中ALP的检测,对于与ALP相关疾病的生理学条件下的诊断有潜在的应用价值。
其他文献
幼时多病,经常使用抗菌素,以致大夫对我说:“十年内你不要再用抗菌素了,因为你体内产生了抗药性。”从此我才知道,治病不仅要对症下药,而且要用药有方,即使灵丹妙药,用法不
柴油车尾气排放的颗粒物(PM)是引起环境问题的主要污染物之一,碳烟会导致严重的健康和环境问题。现在,对于柴油车尾气处理主要使用过滤技术,就是把柴油机颗粒捕集器(Diesel Particu
在当今社会城市化进程加速,建筑空间环境迅猛发展的时代背景下,作为建筑环境艺术的重要组成部分,现代壁画在跨越墙面空间载体的同时,正逐步显现出多元化、多样化、多层次、多维度
由广西社会科学院主办,广西东南亚研究会编纂的《中国—东盟年鉴2016》于2016年12月由中国线状数据出版发行。《中国—东盟年鉴》是一部国际综合性年鉴,着重收载中国和东盟各
随着社会的发展,人口数量越来越多,同时对能源和高效粮食生产产生巨大需求。太阳能是可用的最丰富的可再生能源,如何高效利用太阳能成为目前的研究重点。农作物通常只能利用小部分的太阳光谱,即叶绿素色素吸收的蓝色(400-500 nm)和红色(600-700 nm)光波,而其他波长的大部分光都被浪费。因此,需要开发一种材料来提高太阳光的利用效率。该材料可以吸收植物未利用的太阳光,并将其转化为蓝光或红光。目前
学位
无论抓什么工作,最忌的就是大家泛泛而谈, 谈过之后,束之高阁。但是,在我们的一些地 方,一些部门,恰恰谈风极盛。无论什么事情——中央的方针,国家的决策,上级的指示,群众的
菲并吲哚(喹喏)里西啶生物碱是一大类广泛分布于萝摩科、爵床科和樟科等植物中的生物碱,不仅具有广泛的抗癌、抗炎等生物活性,而且我们课题组还首次发现该类生物碱具有优异的抗植
民国戏曲的编撰,既源自曲家的凭空杜撰,又根植于相关的事实资料。由民国戏曲序跋可知,戏曲题材来源于传说诗文、史籍载志、政治时事及社会生活四类。曲家在编撰戏曲过程中,往
在媒介融合的大背景下,对专业学位研究生培养模式进行研究,对于丰富和发展我国研究生教育,推动学位制度改革具有重要意义。在管理体制与运作机制已经建立,办学规模与培养体系
随着网络时代的到来,各种视频网站蓬勃发展,但是在视频网站迅速发展的背后,隐藏着的却是岌岌可危的现实困境,缺少能够挑大梁的网剧作品、失败的盈利模式等都是目前所面临的问