聚酯类高分子胶束是近年来药剂学研究中一类新型的纳米载体给药系统。高分子胶束由具有亲水性片段和疏水性片段的两亲性嵌段共聚物在水溶液中自发形成,其粒径一般小于100 nm,具有特别的“核-壳”结构,属热力学稳定系统。由于聚合物胶束具有粒径小,能够包载难溶性药物以及提高药物的稳定性,使药物控释释放,提高药物的生物利用度等特点,胶束成为药剂学研究的热点。但是目前有关高分子胶束跨胃肠道生物膜的机制研究较少。对于纳米给药系统而言,上皮细胞所构成的单层细胞一般是药物制剂能否顺利到达靶部位的第一道屏障。研究纳米给药系统与极性上皮细胞的相互作用机制具有重要意义。胶束作为难溶性药物的载体进入血液循环需要跨越由上皮细胞构成的屏障。本研究对胶束如何穿越上皮细胞屏障,胶束是否以整体形式被细胞内吞或直接跨膜上皮细胞屏障,胶束经由细胞内吞或跨膜转运的机制做了系统的研究。荧光探针香豆素6（Coumarin 6）的脂溶性强,在本研究所选择的聚合物材料制备的胶束中的包封率高。香豆素6具有良好的荧光稳定性和较高的荧光量子效率,用高效液相色谱进行定量分析和用激光共聚焦显微镜进行定量分析时可以很好的表征胶束。香豆素6也经常被用于纳米粒的作用机制研究当中。本研究选择香豆素6为荧光探针,采用溶剂成膜法制备了包载香豆素6的聚酯类高分子材料的胶束。对 PEG3000-PCL2500,PEG3000-PLA3000,PEG3000-PLGA3000,PEG5000-PLA5000等聚酯类高分子材料的胶束化行为进行了初步研究,包括粒径,Zeta电位,对香豆素6的包封率,临界胶束浓度,临界聚沉浓度等。由于四种材料疏水嵌段与香豆素6的融合性以及四种材料疏水嵌段和亲水嵌段的长度不同等因素导致了四种胶束对香豆素6的包封率不同。细胞对四种胶束的摄取量的也不同,这可能是由于胶束对香豆素6的包封率不同和粒径不同造成的。从四种材料中选择了细胞摄取量最高的PEG3000-PLA3000为载体材料的胶束,进行胶束细胞跨膜转运机理的研究。本研究选用目前研究较成熟的,有多种表面受体蛋白表达的Madin Darby Canine Kidney（MDCK）细胞作为上皮细胞的模型。本研究探讨了香豆素6胶束在各种条件下经细胞摄取的机制,香豆素6胶束可被不包载香豆素6的空白胶束竞争摄取,表明胶束内核香豆素6的存在并没有改变胶束本身的性质。香豆素6胶束进入细胞的速度很快,在激光共聚焦显微镜下观察,细胞内的绿色荧光强度可以在短时间内达到饱和。香豆素6胶束进入细胞是时间,浓度,温度依赖型的,用不同药理作用的药物作为抑制剂阻断香豆素6胶束进入细胞的特定途径,发现香豆素6胶束的摄取可被网格蛋白介导的胞吞作用的抑制剂如氯丙嗪和细胞质膜微囊介导的胞吞作用的抑制剂如甲基-贝塔-环糊精所抑制,所以香豆素6胶束进入细胞应该是与这两个途径密切相关的。胶束进入细胞的机制不同,在细胞内的分布也不同。利用激光共聚焦显微镜的先进技术如荧光漂白恢复,细胞间连接通讯,荧光共振能量转移等近一步研究表明胶束可以进入细胞膜不完整的细胞,也可以进入正常的细胞,胶束进入细胞的过程中能够改变细胞膜的流动性,胶束可能是以完整形式是通过胞吞作用进入细胞的。在胶束细胞摄取研究的基础上,本研究进行了香豆素6胶束跨膜转运机理的研究。胶束可以通过单层细胞之间的紧密连接即细胞旁路途径穿越单层细胞,胶束也可以通过胞吞作用进入细胞后,从细胞的顶面转运到细胞的基底面。能够跨膜转运的胶束的量相对滞留于单层细胞中的胶束的量要少很多。胶束的跨膜转运过程也是浓度,时间,温度依赖型的,并且也受到抑制剂的影响。本研究利用Transwell进行了香豆素6胶束的跨膜转运研究,构建了一种直接观察胶束在单层细胞上跨膜转运的方法。该方法主要通过利用反射光对Transwell的插入池底的支持物聚碳酯膜成像,可以实时的观测香豆素6胶束在Transwell插入池上生长的单层细胞的跨膜转运,利用激光共聚焦显微镜的荧光定量功能可以同时对Transwell上单层细胞的香豆素6胶束的摄取和跨膜转运的香豆素6胶束进行定量分析。实验结果证明胶束是可以在单层细胞上跨膜转运的。香豆素6不仅可以作为荧光探针标记胶束,也可作为难溶性药物的模型。本研究也利用离体组织法探讨了胶束作为难溶性药物的载体的优势和特点。综上所述,聚酯类高分子胶束是可以通过网格蛋白介导的胞吞作用或者细胞质膜微囊介导的胞吞作用以整体的胶束形式进入细胞的,在这个过程中,细胞膜的流动性会受到影响。胶束可以通过细胞间的紧密连接即细胞旁路途径穿越单层细胞到达细胞的另一侧,也可以从细胞内转运到细胞的对侧。在胶束跨膜转运的过程当中,有许多细胞器起到了关键的作用,它们影响到了胶束在细胞内的分布以及胶束最后的去向等。