目的莲香散为广州中医药大学第一附属医院治疗细菌性腹泻的临床经验方,组方为穿心莲、苍术、木香、厚朴、干姜等药,具有扶正祛邪、行气止痛、燥湿健脾,调节胃肠气机,止泻痢等功效。经广州中医药大学与广州华农大实验兽药公司合作,前期小规模兽医临床试验表明该方具有较好的防治鸡大肠杆菌病功效。为了让该方更好地在养鸡业中发挥作用,由广州中医药大学、广州华农大实验兽药有限公司联合,对该方的有效性和安全性以及质量可控性进行详细研究,拟申报国家三类新兽药。本研究对其进行了临床前部分研究,为莲香散的临床使用及新药注册积累资料。方法:在实验室小试的基础上对生产工艺进行中试扩大化生产,取得不同批次莲香散样品并验证其工艺可行性。对所产莲香散进行质量标准初步研究,包括处方、制法、性状、定性鉴别及定量检测等考察项。之后通过加速试验及长期试验方法考察其稳定性。进而对莲香散进行安全药理学、主要药效学、急性毒性及长期毒性评价研究。成果:1、通过10批产品中试生产,采用现行工艺,操作可行,所得产品质量符合标准。产品生产工艺可行,操作简便,GMP散剂车间完全能够生产,无特殊设备要求。现有的车间无需改造,产品可达到质量标准要求。生产过程中产生的三废易于处理,符合国家有关的环保要求。中试结果表明,莲香散工艺条件适于GMP散剂车间生产,产品符合质量标准草案。2、对莲香散质量标准研究结果表明,建立的薄层色谱法对穿心莲、木香、厚朴、苍术、干姜进行鉴别具有较好的专属性,操作简单;建立的高效液相色谱方法对莲香散有效成分木香烃内酯和去氢木香内酯的含量测定和穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量测定,其准确度、精密度和专属性较好,色谱条件具有较好的分离效果,符合“准确、快速、灵敏、简单”的原则。同时,根据10批莲香散中试产品中穿心莲内、脱水穿心莲内酯、木香烃内酯和去氢木香内酯含量测定结果,以及实际生产过程中一些因素对含量的影响,暂定本品含木香烃内酯和去氢木香内酯的总量不得少于2.5mg/g,脱水穿心莲内酯和穿心莲内酯总量不得少于 1.0mg/g。3、加速试验结果表明,3批中试样品放置6个月后的各项考察项目与第0个月无明显变化,样品质量稳定性较好。长期试验结果表明,3批中试样品连续放置24个月后的各项考察项目与第0个月相比较无明显变化,样品稳定性较好。4、安全药理学实验结果显示莲香散高、中、低剂量组对受试动物SD大鼠消化系统、中枢神经系统、呼吸系统及心血管系统等相关指标均未见明显异常。表明莲香散对大鼠生理指标无明显不良影响,是安全可靠的。药效学研究结果表明莲香散可降低大肠杆菌致腹膜炎小鼠的死亡率;同时有效抑制番泻叶及蓖麻油腹泻模型小鼠的腹泻,其中以高、中剂量组为优,还可抑制肠蠕动功能。5、急性毒性试验未能测得LD50,故进行MTD试验,结果表明莲香散属于无毒物。6、莲香散30d长期毒性试验研究结果表明该复方对SD大鼠未显示毒性反应,说明莲香散无毒性。结论:莲香散临床前研究通过制备工艺、质量标准、稳定性、安全药理学、药效学及毒性试验等研究,表明莲香散中试放大生产工艺方法可行,具有可操作性,能够指导放大生产,其成本控制与普通散剂成本相当;莲香散选用聚乙烯膜材料为内包装、聚酯/铝/聚乙烯复合膜为外包装,其质量较为稳定,有效期可暂定为24个月;质量标准研究所建立的定性、定量方法易于操作,可靠性高;综合实验结果表明莲香散是一种安全、有效、无毒副作用的治疗腹泻的制剂。