表达鹅细小病毒VP3基因重组禽痘病毒的构建

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:yangzexv001
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鹅细小病毒(Goose Parvovirus,GPV)为小鹅瘟的病原体。小鹅瘟主要发生于1月龄内雏鹅和雏番鸭,是以急性肠炎及肝、肾、心实质脏器炎症为特征的烈性传染病,对养鹅业发展造成很大威胁。自1956年我国学者方定一首次发现并分离到GPV后,国外相继也有分离到该病毒的报道,说明该病毒在世界范围内有较为广泛的流行。 目前,对GPV的防制主要是靠疫苗接种。传统疫苗对GPV的预防和控制起到了一定的积极作用,但同时灭活苗存在生产成本高,注射局部炎症反应较强等弊端,弱毒苗又易发生毒力返强等。GPV主要免疫原性蛋白VP3的高度保守性给新型疫苗及分子诊断试剂的研制提供了思路。本研究采用脂质体转染方法,将含有完整GPV H1分离株VP3基因、报告基因LacZ、禽痘病毒早/晚期启动子LP2EP2、痘苗病毒启动子P7.5、P11和FPV-017复制非必须区的转移载体质粒pSY681VP3LacZ与FPV-017共转染鸡胚成纤维细胞,经6轮蚀斑克隆、筛选、表达,PCR鉴定和Dot-ELISA检测,证明该重组病毒已构建成功,并获得了遗传性状稳定的鹅细小病毒VP3基因的重组禽痘病毒。为新型基因工程疫苗的研制奠定了科学的基础,同时也为我国高致病力鹅细小病毒病的防治提供了物质准备。
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