非凝聚态Aβ25-35对新生大鼠海马CA3区锥体神经元钾离子通道mRNA表达影响的研究

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【目的】 Alzheimer’s综合症(AD)是影响记忆和认知功能的进行性退行性神经病变,是痴呆最常见的类型。研究表明,B淀粉样蛋白(Aβ))增加在AD的发病过程中起重要作用,凝聚态Aβ具有明确的神经毒性作用。但亦有人提出,非凝聚态Aβ也可产生神经毒性作用。 本论文研究了非凝聚态AB25-35对新生大鼠海马CA3区锥体神经元钾离子通道mRNA表达的影响,探讨非凝聚态Aβ对电压门控性钾通道的作用机制,以期揭示非凝聚态Aβ在AD发病过程中的作用机理,从而为应用钾通道调节剂预防和治疗AD提供理论依据。 【方法】 采用酶解和机械分离相结合的方法,急性分离新生大鼠海马CA3区锥体神经元。运用微电极技术提取单个细胞,采用RT-PCR扩增mRNA(其中PCR部分采取嵌套式PCR),凝胶电泳成像分析,观察非凝聚态Aβ25-35对大鼠海马CA3区锥体神经元钾离子通道亚型Kv2.1、Kv1.4、Kv4.2表达的影响,分别记录了非凝聚态Aβ25-35对三种亚型mRNA作用的浓度依赖性和时间依赖性。 【结果】 1.延迟整流钾通道亚型Kv2.1,瞬时外向钾通道亚型Kv4.2、Kv1.4的mRNA在大鼠海马CA3区锥体神经元均有不同程度的比较丰富的表达。 2.非凝聚态Aβ(25-35)对大鼠海马CA3区锥体神经元延迟整流钾通道亚型
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