静脉注射骨髓基质细胞治疗大鼠局灶性脑缺血后的NT-3表达 前言 目前脑血管病是人类主要死亡疾病之一，脑梗死是最常见病之一。故对脑梗死研究一直是一个重要的课题，本实验是研究神经营养因子3(neu-rotrophin 3，NT-3)，在静脉注射骨髓基质细胞(BMSC)治疗大鼠局灶性脑缺血后的表达，探讨骨髓基质细胞治疗大鼠局灶性脑缺血的作用机制是否与NT-3蛋白表达有关。 方法 取45只Wistar大鼠，随机将大鼠分配到3组中每组动物15只，分别为股静脉注射生理盐水组(生理盐水组)，正常对照组(非处理组)，股静脉注射骨髓基质细胞组(治疗组)。接Fridershtein方法收集、分离、培养骨髓基质细胞，免疫细胞化学方法鉴定骨髓基质细胞，取第八代之前的细胞，在接种前一天以终浓度0.1mM的溴脱氧尿苷(Brdu)标记，接种时，细胞浓度为3×10~6/ml；改良1onga栓线法制作大鼠局灶性大脑中动脉缺血(MCAO)1小时模型，在缺血后24h股静脉注射生理盐水、正常对照组、股静脉注射Br-du标记的骨髓基质细胞。采用NSS评分，观察脑缺血后3、7、14天神经功能评分，Brdu免疫组化染色Brdu标记的骨髓基质细胞分布以及神经功能改善的影响。 免疫组化测定：实验大鼠用10％水合氯醛腹腔注射(3.5mL/kg)后，以生理盐水及4％多聚甲醛经左心室进行心脏灌注、固定、石蜡包埋，连续冠状切片(厚6um)。应用SABC法，NT-3免疫组化测定，DAB显色剂，常规脱水、透明、树胶封片。应用显微图象分析系统测定脑缺血再灌注3、7、14天NT-3蛋白表达。