华石斛杀线虫活性成分研究

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石斛属(Dendrobium)是兰科(Orchidaceae)中最大的属之一,其种类繁多,大约有1400多种,广泛分布于亚洲亚热带和热带至大洋洲。石斛不仅具有较高的园艺价值,也是中国传统的名贵药材之一。药用价值和保健功能主要有以下几个方面:治疗胃阴不足、病后虚热不退、目暗不明和糖尿病等病症。同时现代药理实验也证明,石斛对抑制肿瘤细胞生长等方面都具有显著疗效,对增强人体免疫力、抗氧化、抗衰老均具有明显作用,因此受到国内外学者的广泛关注。其药用化学成分主要为石斛碱、联苄类、菲类和多糖类物质。华石斛(Dendrobium sinense T. Tang et F. T. Wang)为海南特有种,本研究对华石斛杀线虫活性成分进行了筛选,为该石斛资源的进一步开发利用提供科学依据。本研究采用多种柱色谱技术从其全草乙醇提取物中分离鉴定了 26个化合物。经波谱分析鉴定分别为:鼓槌联苄(1)、华石斛素C (2)、华石斛素A (3)、4,5’-二羟基-3,5-二甲氧基联苄(4)、3,3’,4’-三羟基-4,5-二甲氧基联苄(5)、3,3’-二羟基-4,5-二甲氧基联苄(6)、4-羟基-3,4’,5’,3’-四甲氧基联苄(7)、2’,4’-二羟基查尔酮(8)、2,7-二羟基-3,4,6-三甲氧基-9,10-二氢菲(9)、2,5-二羟基-3,4-二甲氧基-9,10-二氢菲(10)、2,5-二羟基-1,3-二甲氧基-9,10-二氢菲(11) 4,7-二羟基-2,3-二甲氧基-9,10-二氢菲(12)、2,7-二羟基-3, 4-二甲氧基-9,10-二氢菲(13)、2,5,7-三羟基-4-甲氧基-9,10-二氢菲(14)、(+)梣皮树脂醇(15)、十二元内环酯(16)、反式对羟基肉桂酸酯(17)、阿魏酸(18)、(Z)-松柏醛(19)、对羟基苯丙酸甲酯(20)、对羟基苯丙酸(21)、对甲氧基苯乙醇(22)、丁香醛(23)、香草酸(24)、对羟基苯甲酸(25)和 3,9-dihydroxy-megastigma-5-ene (26)。化合物 1~25 为酚性化合物,其中1~7为联苄类化合物,9~14为菲类化合物。化合物1、5、7~ 18、20~21和23 ~ 26为首次从华石斛中分离得到。采用直接触杀法测试了化合物1 ~26的抗全齿复活线虫(Panagrellus redivivus)抑制活性,结果显示,化合物1、4、5、8、17、19、20和22表现出明显的杀线虫活性;采用Ellman法测试了化合物1~26的乙酰胆碱酯酶抑制活性,结果显示,化合物8、9、11、16、18、19、22和26具有明显的乙酰胆碱酯酶抑制活性。本研究从华石斛化学成分角度分析,证实了华石斛植物中具有药用石斛植物的特征性化学成分——联苄类化合物和菲类化合物;从生物活性角度分析,本研究在前人基础上,增加杀线虫活性测试,筛选出杀线虫活性成分,为以后线虫防治、寻找新药源提供科学依据。同时也筛选出了石斛属植物中乙酰胆碱酯酶抑制活性成分,为以后神经保护,预防以及治疗神经退行性老年痴呆提供科学依据。
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