文心兰是一种观赏价值极高的高档兰花,除了少数盆栽之外,最适宜用作切花,专供各种形式的艺术插花之用。但目前由于工业化培育文心兰的整体水平不高,关键生产环节技术薄弱,造成了文心兰繁殖系数偏低,工业化生产效率不高,许多名贵品种相对短缺,供不应求,市场售价极高。对于文心兰组织培养的研究将是解决这一问题的关键环节。 本实验以文心兰根蔸为外植体诱导丛生芽,探索通过以丛生芽途径再生植株的方法进行快速繁殖。对外植体灭菌,丛生芽诱导、丛生芽增殖、生根壮苗、炼苗移栽等过程中各影响因素进行了研究。研究的主要问题集中在对不同外植体的选择、不同灭菌方法的选择、不同基本培养基类型及培养方式的选择、不同激素配比和用量的选择、不同添加物的选择、不同碳源以及不同活性炭用量的选择等多个方面。主要采用正交设计安排试验。本文意图通过上述研究,进一步扩大文心兰外植体选择范围,提高丛生芽增殖系数,寻找出组培快繁各阶段的主要影响因素和最佳培养基配方,筛选出最优技术参数组合,建立文心兰最优再生体系,进而提高文心兰商业化生产效率,解决目前市场上文心兰供不应求的问题,为文心兰工厂化育苗提供技术支持。 结果表明:以文心兰根蔸为外植体,最佳的灭菌方法流程是:根蔸→自来水冲去泥沙→洗衣粉上清液浸泡10分钟并用软刷刷去表面污垢→自来水冲洗1小时→置于超净工作台上→ 70%酒精 30s→无菌水冲洗 3 次→0.2%Hgcl2 浸8min→无菌水冲洗 8 次→吸干水分→接种。无菌率达到 84.62%。 影响文心兰根蔸诱导丛生芽的主要因素是细胞分裂素 BA 和天然添加物,其中以 BA4.0mgL-1 和椰乳汁 150mlL-1 最优。次要因素是生长素 NAA,以NAA0.4mgL-1 较优。诱导根蔸外植体发生丛生芽最适宜的培养基配方是KC+BA4.0mgL-1 +NAA0.4mgL-1+椰乳汁 150mlL-1+Vc0.2mgL-1+活性炭 1.0gL-1+糖 30gL-1+琼脂 8.0gL-1+pH5.4。诱导率平均达 83.33%。 影响文心兰丛生芽增殖的主要因素有基本培养基、BA、NAA、苗高、丛植密度、活性炭、培养基的酸碱度以及苗处理方式。其中,基本培养基选用 MS、BA 取 4.0mgL-1、NAA 取 0.4mgL-1 可以明显促进丛生芽增殖;材料选用 3cm 左右高的小苗,苗基部竖向切割处理,并且按每瓶接种 4 株的丛植密度接种可以明显促进丛生芽增殖;培养基中添加 1.0～2.0gL-1的活性炭,培养基的酸碱度调至5.1～5.4,也可明显促进丛生芽增殖。次要因素有天然添加物,以椰乳汁 150mlL-1或番茄汁 150mlL-1 较好。而无论是食糖、蔗糖还是葡萄糖对丛生芽增殖的影响差 别 不 大 , 都 可 选 择 。 丛 生 芽 增 殖 最 适 宜 的 培 养 基 配 方 是