论文部分内容阅读
背景及目的:表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor ,EGFR)是一种具有酪氨酸激酶活性的生长因子受体,在正常细胞表达率低,而在多种肿瘤细胞如肺癌,大肠癌,肾癌和头颈部鳞癌等中则有过度表达。EGFR信号通路在癌症的发生发展中起着重要作用。目前作用于EGFR信号通路的多种药物已在肿瘤的治疗中得到广泛的应用。文献报道,在肝癌组织及癌旁组织中存在EGFR的高表达,干扰肝癌细胞EGFR信号通路是否影响细胞生长目前尚不清楚。尼妥珠单抗(nimotuzumab,h-R3)是一种能够识别人EGFR膜外结构域表位的新型基因工程人源化单克隆抗体,可以特异性阻断EGFR及其介导的信号转导通路。为了解h-R3单独和与化疗药物合用后对肝癌细胞生长的影响,本研究将h-R3与表阿霉素(epirubici, EPI)单独和联合作用于人肝癌细胞株HepG2,观察它们对HepG2细胞生长的影响。方法:人肝癌细胞株HepG2传代2-3d后进入研究;选用浓度递增的h-R3和EPI,单独和联合作用于HepG2细胞,采用MTT法检测在不同时间点不同药物剂量时对HepG2细胞生长的影响,并且计算两者联用时的q值,了解尼妥珠单抗与EPI联合作用于肝癌细胞是否具有相加或协同作用;流式细胞仪PI单染法检测细胞周期的DNA含量,分析比较单药表阿霉素及表阿霉素联合h-R3在不同时间诱导HepG2细胞的凋亡率,以及h-R3和EPI作用于HepG2细胞的细胞周期分布情况。结果: h-R3和EPI单药对HepG2细胞生长均有抑制作用,并均呈时间和剂量依耐性,两药单独作用72h后对HepG2细胞生长最高抑制率分别为(49.56±8.93)%和(92.97±1.19)%,两药联合对HepG2细胞生长的最高抑制率为(96.44±1.0)%,联合用药可提高细胞增殖抑制率,通过q值提示两药联合对细胞增殖抑制有相加作用;流式细胞仪检测发现,联合组细胞凋亡率高于单药组,并且随时间的增加,凋亡率呈升高趋势;细胞周期检测h-R3使细胞阻滞在G0/G1期,EPI阻滞细胞在S期,提示两药均影响细胞周期分布。结论: h-R3在体外与EPI联合可提高对HepG2细胞增殖抑制及凋亡的作用,两药可影响HepG2细胞周期的分布。