出血转化是急性脑卒中溶栓治疗过程中最严重的并发症之一,血脑屏障(blood brain barrier,BBB)完整性的破坏是主要的病理基础。因此,研究急性脑缺血早期BBB损伤的机制并寻求干预靶点将成为降低出血转化的重要策略。我们之前的研究结果表明,急性缺血2小时BBB的损伤首先发生在腹侧纹状体,然而机制并不清楚。已有文献报道,急性脑缺血会导致纹状体区域多巴胺的显著增加,而注射多巴胺受体1(dopamine 1 receptor,D1R)激动剂SKF38393能显著增加腹侧纹状体组织型纤溶酶原激活剂(tissue plasminogen activator,tPA)的活性,tPA的激活已经被证明可损伤BBB。因此,我们提出假说,急性脑缺血引起腹侧纹状体多巴胺显著升高,通过激活内源性tPA造成BBB损伤。目的:通过研究早期BBB损伤机制,为溶栓期减低出血转化提供理论依据。方法:动物选用体重在270到290克的SD大鼠,适应2天,进行大脑中动脉栓塞(MCAO)模型构建:缺血2小时,再灌注5分钟。将大鼠分成四组:(1)Vehicle 组(2)Neuroserpin 组(tPA 抑制剂)(3)SCH23390 组(多巴胺受体 1拮抗剂)(4)YC-1组(HIF-1α抑制剂)。Neuroserpin在MCAO手术前0.5小时通过脑立体定位注射到纹状体;SCH23390通过脑立体定位注射到纹状体,注射完成后立即进行MCAO手术;YC-1在MCAO手术前24小时和0.5小时通过股静脉注射。缺血2小时后,股静脉注射伊文思蓝(EB),循环10分钟后通过心脏灌流的方式处死大鼠,取脑组织备用。利用EB和IgG(免疫球蛋白)泄露检测血脑屏障的完整性,用tPA原位酶谱法检测内源性tPA的活性,用免疫荧光化学染色检测紧密连接蛋白occludin的表达,通过Western blot检测紧密连接蛋白occludin及tPA的表达。结果:1、急性缺血2小时在BBB损伤区域内源性tPA显著增加,在纹状体注射tPA抑制剂Neuroserpin,显著减少缺血导致的BBB损伤。2、在纹状体注射D1R拮抗剂SCH23390显著减少内源性tPA的表达,从而有效减轻脑缺血引起的BBB损伤及紧密连接蛋白occludin的降解。3、注射HIF-1α的抑制剂YC-1可以减少缺血导致的内源性tPA的上调及BBB损伤。结论:我们的结果表明,急性缺血期通过上调HIF-1α增加多巴胺与D1R相互作用,进而激活内源性tPA破坏BBB。我们通过对早期BBB损伤进行研究,希望找到有效的治疗策略,在临床上为延长tPA的溶栓时间窗及降低出血转化提供理论依据。