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目的：神经病理痛(Neuropathic pain)是由外周或中枢神经系统结构损伤或功能紊乱所导致的病理性疼痛。实验室前期的研究工作已观察到神经病理痛模型大鼠背根神经节(dorsal root ganglia, DRG)神经细胞中血管内皮生长因子(VEGF)免疫反应性增强。鞘内应用抗重组血管内皮生长因子抗体(Anti-recombinant vascular endothelial growth factor antibody,简称Anti-rVEGF)可使神经病理痛模型大鼠后足的机械和热痛阈值降低,VEGFR-2、P2X3及P2X2/3受体表达减少。本研究进一步通过电生理方法观察在大鼠DRG神经细胞,VEGF对P2X3受体和P2X2/3受体激动剂激活电流的调制作用,并结合免疫组织荧光双标观察神经病理痛模型大鼠L4-6背根神经节细胞VEGFR-2、P2X2及P2X3受体共表达以了解相互之间关系；进而用免疫组织化学、免疫组织荧光双标和蛋白印迹分析方法观察神经病理痛模型大鼠L4/5段脊髓背角神经细胞VEGFR-2、P2X2和P2X3受体的相互关系,以期拓宽和深化对神经病理痛发病机理的认识,为防治神经病理痛提供新的靶点。方法：建立坐骨神经结扎损伤模型。SD雄性大鼠随机分为三组：假手术组(Sham group, A),坐骨神经慢性压迫性损伤神经病理痛模型组(chronic constriction injury, CCI) (CCI+PBS group, B)和Anti-rVEGF处理神经病理痛模型组(CCI+Anti-rVEGF group, C)。C组每隔一天鞘内注射Anti-rVEGF抗体,A和B组同时间注射磷酸盐缓冲生理盐水。CCI术后第14天急性分离大鼠手术侧L4-6背根神经节和L4/5段脊髓背角,通过免疫组织化学、免疫组织荧光双标和蛋白印迹分析方法检测DRG神经细胞和L4/5段脊髓背角VEGFR-2、P2X2和P2X3的表达。应用全细胞膜片钳技术在大鼠新鲜分离的DRG神经细胞上记录VEGF对P2X3受体激动剂和P2X2/3受体特异性激动剂激活电流的调制作用。结果：免疫荧光双标结果显示三组背根神经节神经细胞VEGFR-2均分别有P2X2受体、P2X3受体免疫荧光共表达。B组与A组比较VEGFR-2和P2X2受体、P2X3受体荧光表达量更明显,经Anti-rVEGF抗体处理后,荧光亮度减弱,表达降低。膜片钳实验结果表明大部分DRG神经细胞外力ATP(1-1000μmol·L-1),引起剂量依赖性的内向电流IATP,且随浓度增加IATP增大。P2X2/3受体特异性激动剂α,β-meATP可产生类似电流,该电流也能被P2X2/3受体特异性拮抗剂A-317491所抑制。预加VEGF,对ATP电流和α,β-meATP电流都有增强作用,此增强作用均可被VEGF拮抗剂vatalanib抑制。免疫组化结果显示B组L4/5脊髓背角的VEGFR-2、P2X2和P2X3的阳性细胞光密度值均高于A组和C组(p<0.05)；免疫荧光双标结果显示L4/5段脊髓背角VEGFR-2均分别有P2X2受体、P2X3受体免疫荧光共表达。B组与A组比较VEGFR-2和P2X2受体、P2X3受体荧光表达量更明显,经Anti-rVEGF抗体处理后,荧光亮度减弱,表达降低。蛋白印迹分析表明在目的条带经β-actin标化后C组L4/5脊髓背角的VEGFR-2、P2X2和P2X3的蛋白表达均明显低于B组(p<0.01),但仍高于A组(p>0.05)。结论：神经病理痛模型大鼠背根神经节神经细胞和脊髓背角的VEGFR-2、P2X2和P2X3受体存在共表达并表达上调,电生理结果显示VEGF增大P2X3或P2X2/3受体激动剂激活电流。提示VEGFR-2与P2X3或P2X2/3受体在神经病理痛发病过程中存在相互协同作用,VEGF可增强P2X3或P2X2/3受体在神经病理痛中的作用。