【摘 要】
:
赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)是由曲霉属、青霉属等不同菌种产生的真菌毒素。由于其具有强致畸性、神经毒性、免疫毒性和致癌作用,严重危害了公众健康和食品安全,因此,OTA的快速、准确检测研究受到极大关注。OTA检测方法常用的有质谱、高效色谱和基于抗体的免疫技术。这些方法对于OTA的测量具有良好的稳定性、准确性和可靠性,但它们耗时、复杂、需要大量的精密设备和高技能专业操作人员。为此,开
论文部分内容阅读
赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)是由曲霉属、青霉属等不同菌种产生的真菌毒素。由于其具有强致畸性、神经毒性、免疫毒性和致癌作用,严重危害了公众健康和食品安全,因此,OTA的快速、准确检测研究受到极大关注。OTA检测方法常用的有质谱、高效色谱和基于抗体的免疫技术。这些方法对于OTA的测量具有良好的稳定性、准确性和可靠性,但它们耗时、复杂、需要大量的精密设备和高技能专业操作人员。为此,开发一种快速、灵敏、易于操作的OTA检测方法至关重要。近年来,核酸适配体的生物传感技术因其高效、灵活、易操作等显著特点在食用农产品(食品)安全检测领域得到了广泛关注。随着分析方法与纳米技术的快速发展,国内外研究团队已经报道了大量基于适配体的传感快速检测方法,用于金属离子、生物分子、病毒以及细胞等一系列目标物的分析。基于此,本研究以OTA为检测对象,将核酸适配体改造并组装三螺旋DNA分子开关,构建免标记的比色生物传感器,进一步,我们利用适配体与OTA识别前后构象的改变并结合硫磺素T(Thioflavin T,Th T)构建免标记的荧光生物传感器,最终实现比色、荧光双模式快速、灵敏检测OTA。本研究的主要内容及相关结果如下:(1)根据沃森-克里克(Watson-Crick)和胡斯坦(Hoogsteen)碱基配对原则,构建了三螺旋分子开关(THMS)比色生物传感平台快速检测OTA。THMS由一个经适当改造的适配体和一个在3’端含有腺嘌呤的富含鸟嘌呤(G)的寡核苷酸序列组装而成。在OTA存在的情况下,适配体序列识别并与目标物结合,使THMS发生结构转换,释放富含鸟嘌呤的寡核苷酸序列,通过在该序列3’端添加腺嘌呤提高灵敏度。该序列在K+存在时形成G-四链体,并与hemin结合形成具有辣根过氧化物酶活性的DNAzyme,催化双氧水氧化ABTS2-,产生颜色变化,输出检测信号。相反,在没有OTA的情况下,三螺旋结构稳定,仅有低背景信号。在最佳反应条件下,检测信号与目标物OTA的浓度保持线性关系,范围为10μg·kg-1~1 500μg·kg-1,检出限低至4μg·kg-1。该设计利用了经合适改造的适配体和富G序列,具有高效、特异和快速等特点,为可视化快速检测OTA提供了新思路。(2)进一步,我们利用适配体与OTA识别前后构象的改变并结合硫磺素T(Thioflavin T,Th T)构建免标记的荧光生物传感器,快速、灵敏检测OTA。在荧光小分子Th T的存在下,OTA适配体由反平行G-四链体转向平行G-四链体并产生强荧光,随着OTA浓度逐渐增大,转变为平行结构的G-四链体逐渐被诱导为反平行结构,荧光逐渐下降。该方法简便、快速,且对OTA灵敏度高,在最优反应条件下,OTA浓度的线性范围为0.05μg·kg-1~600μg·kg-1,检出限为0.01μg·kg-1,对OTA具有较好的特异性,在食品安全领域具有良好的应用前景。
其他文献
为了研究毛竹(Phyllostachys edulis)释放的挥发性有机化合物(VOCs)对空气负离子及空气微生物的影响,采用动态顶空气体循环吸附法和热脱附-气相色谱-质谱(TDS-GC-MS)联用技术,分析了近自然状态下毛竹释放的VOCs在不同时间(7:00、10:00、13:00、16:00、19:00)、不同海拔(200 m、240 m、280 m、320 m)、不同季节(春季、夏季、秋季)
随着高速铁路建设的不断发展,在大跨斜拉桥主梁上铺设无砟轨道已是必然趋势,但大跨斜拉桥结构复杂,其主梁结构受温度、荷载等环境因素影响产生的变形较大,造成主梁上各CPⅢ点的三维坐标存在多值性问题,使施工期间主梁上无砟轨道的铺设工作以及运营期间主梁上轨道的维修工作无法进行。针对上述问题,本文对大跨斜拉桥主梁上的无砟轨道控制网的测设方法进行了研究,旨在解决其主梁上CPⅢ控制网多值性的问题,主要包括以下研究
金属增材制造(Additative Manufacturing,AM)作为一种先进的高性能构件加工技术,具有高柔性、低能耗、复杂构件加工适应性强等显著技术优势,已成为增强高铁核心竞争力的前沿技术之一。铝合金具有密度小、塑性好、比强高、耐腐蚀性能好等优点,是高速列车轻量化结构设计的首选材料。然而,增材铝合金在成形过程中极易产生未熔合、气孔、裂纹等缺陷,严重降低其疲劳性能,是影响其发展和应用的重要原因
研究背景直肠癌在我国发病率较高且以中低位直肠癌居多,其中局部进展期低位直肠癌手术难度大、术后复发率高、生活质量较差。尽管新辅助放化疗的应用使得局部进展期直肠癌患者的术后复发率得到了显著的改善,患者的远期生存能否从中获益却未能明确。随着多学科综合治疗和全直肠系膜切除理念的普及以及超低位保肛手术的发展,直肠癌患者的保肛率得到较大的提高,但低位直肠癌患者术后生活质量能否因此得到改善仍存在一定的争议,然而
上世纪70年代兴起的“绿色革命”,使得小麦的产量有了质的提升。但是小麦株高的降低也带来了植株生物量变小,叶层过于紧密,透气性差,光能利用率低等新问题。本研究基于55K芯片标记,以ZNL12号和7AS为亲本创制了一套DH群体材料(含有178个株系)作为定位群体,利用覆盖小麦全部21条染色体的55K标记构建了遗传图谱。2018-2019连续两年将材料分别种植在杭州市临安区和温州市藤桥镇。在小麦的成熟期
在2019年7月国家农业农村部发布《中华人民共和国农业农村部公告第194号)》有关抗生素使用相关公告,2020年我国饲料中将全面禁止抗生素的添加;所以益生菌、酶制剂、植物精油、锌制剂等抗生素替代物将在养殖中发挥重要的作用。丁酸梭菌作为益生菌的一种,可以调节机体肠道酸性环境,降低p H,抑制有害微生物在肠道中滋生,维持肠道内环境稳态而被畜牧业做为饲料添加剂广泛使用。番鸭作为一种重要的经济动物,因其肉
2017年10月,中共中央办公厅印发《关于在全国各地推开国家监察体制改革试点方案》,部署在全国范围内深化国家监察体制改革的探索实践,完成省、市、县三级监察委员会组建工作,实现对所有行使公权力的公职人员监察全覆盖。之后短短3个多月,全国省、市、县三级监察委员会全部组建完成,深化国家监察体制改革试点工作取得重要阶段性成果。2018年3月,全国人民代表大会通过了《宪法》修正案和《监察法》,为国家监察机关
随着广大人民生活水平的提高,为满足人民的物质需求和方便出行,铁路运输作为一种主流的运输方式,其运量大、效益高的特点受到国内外广泛关注。我国相继开通了京广高铁、京沪高铁、朔黄和大秦重载铁路。随着列车总重和行车频次的增加,钢轨磨耗的行为越来越凸显,一些客货混跑的小半径曲线段钢轨的侧面磨耗更加严重,这不仅给车辆运行带来了严重的安全隐患,还增加了铁路运输的成本,严重损害了铁路运输的经济效益。故本文研究了钢
小麦抽穗期直接反映小麦品种生育期的长短,适宜的抽穗期在维持小麦高产稳产中起着关键作用。本实验室前期利用普通小麦-野生二粒小麦染色体臂置换系(Chromosome arm substitution line,CASL)在野生二粒小麦染色体7B短臂上定位到一个LOD值为7.68,表型贡献率为9.14%的QTL。本研究利用全基因组重测序和转录组测序技术对CASL7BS的染色体组成进行鉴定;通过BSR-s
教材是课堂教学的要素之一,也是教学的主要依据。想要提高课堂教学质量,寻找一本理想的教材是非常必要的。理想教材最基本的要求是教材内容与教学目标相一致,能激发学生的学习兴趣和积极性,便于教与学,而满足这样的要求绝非易事。正因为如此,如何编写一本理想的第二语言教材成为第二语言教学中一个非常重要和紧迫的问题。第二语言教学应面向不同的教学对象,设置不同的课程,尽量采用不同的教学方法。此外,根据具体国情和文化