调衡方对荷瘤小鼠肿瘤微环境中Foxp3+Treg细胞的影响

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目的:通过动物实验,研究不同剂量调衡方对Foxp+Treg细胞的影响,用免疫组化法检测Lewis肺癌荷瘤鼠和H22肝癌荷瘤鼠肿瘤局部微环境中Foxp3、TGF-β、IL-10三项指标,阐释中医扶正祛邪疗法的优势所在,完善调衡方治疗肿瘤的理论基础,为临床选药拓展思路。  方法:本实验采用Lewis肺癌模型和H22肝癌模型进行研究。Lewis肺癌模型建立及处理:将培养好的Lewis肺癌细胞制成悬液,细胞计数为1.3×106/ml,接种在C57BL/6小鼠左前腋下,将接种后的小鼠按随机分组原则分为5组,10只/组。于接种后第二天开始灌胃,给药10天后,摘取瘤块组织固定于10%中性福尔马林中,用免疫组化法检测瘤组织中Foxp3、TGF-β、IL-10表达,结果采用计算机图像分析系统进行分析Foxp3、TGF-β、IL-10阳性率。H22肝癌模型建立及处理:将培养好的H22肝癌细胞制成悬液,细胞计数为1.3×106/ml,接种在昆明种小鼠左前腋下,将接种后的小鼠按随机分组原则分为5组,10只/组。接种后第二天开始灌胃,给药10天后,摘取瘤块组织固定于10%中性福尔马林中,免疫组化方法检测瘤组织中Foxp3、TGF-β、IL-10表达,结果采用计算机图像分析系统进行分析Foxp3、TGF-β、IL-10阳性率。  结果:调衡方对Lewis肺癌荷瘤小鼠实验表明:调衡方大、中剂量、贞芪对照组与荷瘤模型组比较Foxp3、TGF-β、IL-10的表达量存在显著差异(P<0.01),调衡方小剂量与荷瘤模型组比较Foxp3、TGF-β、IL-10表达量存在差异,具有统计学意义(P<0.05);调衡方对H22荷瘤鼠实验表明:调衡方大、中剂量、贞芪对照组与荷瘤模型组比较Foxp3、TGF-β、IL-10的表达量存在显著差异(P<0.01),调衡方小剂量与荷瘤模型组比较Foxp3、TGF-β、IL-10表达量存在差异,具有统计学意义(P<0.05);以上结果提示调衡方能够降低Lewis肺癌、H22肝癌荷瘤小鼠瘤组织中Foxp3、TGF-β、IL-10的表达水平。  结论:前期实验证明,对于不同瘤株,调衡方均具有抑制肿瘤生长及转移作用。本次实验选取Lewis肺癌和H22肝癌荷瘤模型,从Foxp3+Treg角度出发,探讨其对肿瘤微环境中免疫抑制状态的调控作用;提示调衡方对荷瘤机体的影响,可能与其降低肿瘤微环境中Foxp3、TGF-β、IL-10的表达量相关,并以此为基础改善荷瘤体肿瘤局部微环境的免疫抑制状态,调整机体的免疫功能,从而发挥抗瘤抑瘤的作用。并且这种治疗效果能够作用于不同品系的肿瘤。
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