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目的:通过建立硬皮病小鼠模型,培养小鼠皮肤成纤维细胞,检测体内及细胞中TGF-β1、MMP-9与MCP-1表达水平来研究温阳活血通络方对硬皮病小鼠的作用。方法:实验选用50只雌性Balb/c小鼠,其中45只采用博来霉素皮下注射制造硬皮病小鼠模型,5只作为正常对照组。模型组小鼠分别给予温阳活血通络方、醋酸泼尼松、二药联合、生理盐水灌胃28天;HE染色与Masson染色观察皮肤与肺组织病理学改变,ELISA检测血清中TGF-β1、MMP-9与MCP-1表达;免疫组化检测皮肤组织中三者表达水平。取模型鼠病灶皮肤培养原代皮肤成纤维细胞,并加入C3f刺激,再加入不同浓度梯度的温阳活血通络方,MTT法检测细胞增殖情况;ELISA检测细胞上清液TGF-β1、MMP-9与MCP-1的表达情况。结果:(1)HE与Masson染色显示模型鼠病灶皮肤明显增厚,胶原纤维沉积,真皮下血管增粗,管腔狭窄,真皮层皮下附属器减少,伴随大量炎性细胞浸润;模型鼠肺组织肺泡间隔增厚,胶原沉积,伴随大量炎性细胞浸润,小血管壁增厚甚至闭塞。各治疗组病理学改变较模型组均有不同程度改善,尤以温阳活血通络方联合泼尼松治疗组改善最为明显(P<0.05)。(2)TGF-β1、MMP-9与MCP-1在模型鼠皮肤组织中的表达部位有一定差异。各治疗组TGF-β1与MCP-1较模型组均明显减弱(P<0.05),而MMP-9则较模型组增强,尤以两药联合治疗组变化明显。(3)模型鼠血清中TGF-β1与MCP-1表达较正常鼠均显著升高(P<0.01),治疗后,TGF-β1与MCP-1表达明显降低(P<0.05),而模型鼠MMP-9表达较正常鼠轻度升高,治疗后MMP-9表达反而继续升高,尤以两药联合治疗组变化明显。(4)经C3f刺激后的细胞上清中TGF-β1与MCP-1表达均明显增高(P<0.05),而MMP-9则变化不明显(P>0.05),加入温阳活血通络方后,TGF-β1与MCP-1表达下调,MMP-9表达则上调,且与药物浓度呈剂量依耐性(P<0.05)。结论:WHT能够改善硬皮病小鼠皮肤与肺组织的病理学变化,且可能通过下调皮肤成纤维细胞中TGF-β1与MCP-1、上调MMP-9来发挥治疗作用。