光谱法、电化学法检测巯基化合物含量的研究

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巯基化合物广泛存在于生物体内,并起到对重金属解毒、拮抗电离辐射、清除自由基等作用;还与机体生长发育、延缓衰老及某些疾病有关。因此,建立简易、快速、便捷的巯基类物质的分析测定方法具有重要的意义。本文从以下三章进行详细的探讨。第一章绪论综述了存在于生物体内还原型谷胱甘肽的合成及其生理作用,指明了研究巯基类化合物的重要性,总结了其他学者测定巯基类化合物的方法,并提出本文的选题思想和研究内容。第二章可食用蕈菌中巯基化合物含量的测定筛选富含巯基肽的作物来作为防病治病的外源性补充剂比起利用化学合成制剂更经济、更有效。本研究对市面上常见的可食用蕈菌(蘑菇)中巯基类物质的含量作一检测。目前,生物样品中巯基类化合物的含量测定大多涉及细胞破壁、溶剂提取等前处理过程,期间必然受到氧化性化学环境的影响,使还原性巯基受到化学修饰和变性,导致测定结果无法反应生物样品本身含巯基类化合物的真实含量甚至导致漏检。本研究基于巯基衍生化试剂作为探针,提出了一种利用衍生化试剂和蕈菌样品同步超声破壁提取巯基类化合物的新型样品前处理方法,并与一般样品前处理方法进行比较。通过实验结果表明:新法可以较为完整、全面的表征生物体细胞内巯基类物质的含量。并利用邻苯二甲醛(OPA)衍生化试剂对还原型谷胱甘肽(GSH)进行了定性、定量分析。本研究对开发一种简便、可靠的生物样品含巯基肽的原位分析方法作一新的尝试和探讨。第三章5,5’-二硫硝基苯甲酸的电化学性质及测定谷胱甘肽的应用利用循环伏安法研究了巯基衍生化试剂,5,5’--二硫硝基苯甲酸(DTNB)在玻碳电极上的循环伏安特性。NTNB的二硫键在玻碳电极上出现灵敏的阴极还原电流。通过酸度、扫描起始电位、还原型谷胱甘肽(GSH)、扫描次数对DTNB的电化学性质的影响,确立了DTNB在电极上各氧化还原峰的归属,并提出了电极反应机理。根据DTNB二硫键的还原峰电流随GSH浓度的增加线性降低的特性,建立了伏安法灵敏测定GSH含量的分析方法,并与常规光度法测定结果相比较两者结果相吻合。
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