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Akirin基因家族在骨骼肌发育上具有重要作用。该基因家族有两个成员,Akirin1和Akirin2,研究报道鸟类基因组仅含有一个成员Akirin2。为研究鸟类Akirin2基因的功能,在鸭成肌细胞中过表达Akirin2基因、异源表达鼠Akirin1基因后,结合荧光定量、免疫荧光、蛋白印迹以及流式细胞术等手段,研究了Akirin2基因在鸭成肌细胞中的作用。主要研究结果如下:(1)将鼠Akirin1与Akirin2基因分别与多个鸟类基因组比对分析,仅在鸟类基因组中发现一个Akirin同源基因。该同源基因与鼠Akirin2基因有着80%以上的同源性,而与鼠Akirin1基因仅有41%~45%的同源性。进化树结果显示,所选鸟类Akirin同源基因与其他物种Akirin2聚为一类。结构功能域分析结果显示,所选鸟类Akirin结构域与其他物种Akirin2高度相似。(2)通过低浓度马血清成功将鸭成肌细胞进行诱导分化。成功构建鸭Akirin2基因真核表达载体并将其转染至鸭成肌细胞后,生肌调控因子(MRFs)、肌细胞增强因子2(MEF2s)基因家族各成员的表达量、细胞周期的退出与细胞周期相关调控因子(Cyclin D家族与p21)的表达,以及肌管数目均无显著变化,表明过表达鸭Akirin2基因不能够影响成肌细胞分化。(3)过表达鸭Akirin2基因后,成肌细胞增殖活性显著提高。细胞周期相关调控因子(Cyclin D家族)的表达无显著变化,但胞内蛋白合成因子(S6K)的表达量显著升高。培养基添加mTOR特异性抑制剂雷帕霉素后,Akirin2基因对成肌细胞增殖活性以及胞内蛋白合成因子(S6K)的正向调控作用受到了阻断,表明鸭Akirin2能够通过mTOR/S6K通路调控成肌细胞增殖。(4)生物信息预测及双荧光素报告载体证实miR-365能够靶向结合Akirin2基因3’UTR区域。过表达miR-365后,胞内蛋白合成相关因子(mTOR、S6K)表达量显著降低,鸭成肌细胞增殖活性以及BrdU阳性细胞数目显著降低,进一步表明Akirin2基因能通过影响胞内蛋白合成相因子(mTOR、S6K)的表达调控成肌细胞的增殖。(5)异源表达Akirin1基因于鸭成肌细胞后,生肌调控因子MRF4以及肌细胞增强因子MEF2B的表达量均显著升高,同时,p38MAPK以及PI3K/Akt信号通路相关因子的表达量也显著升高。但培养基添加p38MAPK特异性抑制剂SB203580后,p-p38α和MRF4基因表达量显著降低,表明Akirin1可能通过p38MAPK信号通路介导调控成肌细胞分化。此外,培养基添加PI3K特异性抑制剂LY294002后,p-Akt和MEF2B基因表达量也显著降低,表明Akirin1也可能通过PI3K/Akt信号通路介导调控成肌细胞分化。综上,所选鸟类基因组中仅含有Akirin2的同源序列。鸭Akirin2基因与成肌细胞分化过程无关,但能够调控成肌细胞增殖,其作用可能是通过mTOR/S6K通路介导实现的。异源表达鼠Akirin1基因能诱导鸭成肌细胞分化,可能由PI3K/Akt以及p38MAPK信号通路介导。本研究明确了鸭Akirin2基因在成肌细胞增殖中的作用,为鸟类Akirin基因功能研究奠定了基础。